李瑞云 华鑫玲

角黄素天然存在于蛋类、肝脏、鱼类等中，主要用作动物饲料添加剂，尤其在蛋类中比较容易残留。之前我们都认为，蛋黄越黄证明鸡蛋品质越好，但实际上这也可能是角黄素的积聚。据部分研究所得，摄取大量角黄素，可导致色素积聚于视网膜，对身体造成极大危害。本文比较了乙腈提取法、乙腈丙酮提取法、石油醚提取法的优劣，从而得到了提取角黄素的最佳条件。

一、实验部分

1.仪器与试剂。试剂：样品基质（鸡蛋）、角黄素标准品、乙腈、丙酮、石油醚、乙腈丙酮提取剂（50：50）。仪器：高效液相色谱仪（安捷伦1200）、高效液相色谱仪（Waters e2695）、组织匀浆机、离心机、氮吹机、电子天平。

2.标准曲线制备。角黄素标准溶液（9.5μg/mL）：准确称取纯度为95%的角黄素标准物质1.0mg于100mL容量瓶，选用乙腈为溶剂溶解标准品，完全溶解后定容、混匀，其中角黄素浓度为9.5μg/mL。标准溶液置于-18℃冰箱中避光保存。

角黄素标准工作液：分别吸取1.00mL、2.00mL、4.00mL、8.00mL、10.00mL角黄素标准溶液于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。其中角黄素工作液浓度为0.95μg/mL、1.9μg/mL、3.8μg/mL、7.6μg/mL、9.5μg/mL。

3.分析步骤。试样制备：取多个鸡蛋，洗净去壳后用组织匀浆机充分搅拌均匀，放入玻璃瓶中。试样保存：将试样于-18℃避光条件下保存。提取：按表1所示进行提取。

二、结果与讨论

1.线性关系。以标准溶液浓度为横坐标，角黄素峰面积为纵坐标，建立回归方程y=33.342x-1.375，R2=0.9997。

2.回收率试验。以鸡蛋为基质空白样品数据，见表2。然后采取空白试样加标回收法，确定方法回收率。称取2g空白试样，精密加入9.5μg/mL角黄素标准物质1mL，最后计算出回收率。……