曲大伟 原平玫

【摘 要】：目的本文主要针对脑脊液有核细胞计数偏低时细胞染色分类对临床的参考价值进行分析研究。方法选取2016年6月到2019年10月期间有核细胞计数<20×106/L的脑脊液标本113例，细胞染色分类结果与患者的临床资料进行分析。结果发现17例标本存在异常细胞，其中胃癌转移细胞29.4%（5/17），肺癌转移细胞23.5%（4/17），淋巴瘤细胞17.6%（3/17），乳腺癌转移细胞5.9%（1/17），白血病幼稚细胞11.8%（2/17），吞噬细胞（有含铁血黄素）11.8%（2/17）;淋巴细胞分类升高（>80%）有34例，单核细胞升高（>45%）18例，1例出现嗜酸性粒细胞高（>5%）。脑膜转移癌细胞染色分类法检出异常细胞的阳性率为71.4%（10/14）明顯高于头颅CT/MRI检查21.4%（3/14），有差异显著统计学意义（P=0.021）。结论脑脊液细胞计数<20×106/L时仍需要进行细胞染色分类，特别是对于怀疑脑膜转移癌、淋巴瘤侵犯中枢和中枢神经系统白血病患者，而且细胞染色分类法早期诊断作用可能优于CT/MRI检查。

【关键词】：脑脊液;细胞染色分类;计数偏低;异常细胞

【中图分类号】R446.14【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2020）07-21--01

引言

结核性脑膜炎（简称结脑），是由结核分枝杆菌感染引起的脑膜、脊膜的慢性非化脓炎症，严重时可侵犯脑血管、脑实质及脊髓，有很高的致残率和病死率，其预后与早期诊断和及时抗结核治疗密切相关。因此，寻找快速、敏感性高、特异性强、操作简单的结脑早期诊断方法，一直是结脑研究中亟待解决的问题。本研究观察脑脊液细胞学的动态变化，并对脑脊液进行玻片离心改良抗酸染色检测，旨在探讨2种方法在结脑早期诊断中的临床价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取烟台业达医院2016年6月至2019年10月期间住院采集的有核细胞计数均在20×106/L以下的脑脊液标本113例。同步通过住院信息系统收集患者的临床病例资料，通过LIS系统收集同一份脑脊液标本的葡萄糖、氯化物、血清腺苷脱氨酶（ADA）和总蛋白等生化检验结果。

1.2 方法

1.2.1 染色前处理

对脑脊液玻片离心制片：用吸水纸做夹层，用专用甩片固定夹子依次按顺序固定玻片与吸水纸及专用离心漏斗，放置甩片机上，滴入新鲜脑脊液0.3-0.Sml（不超过O.SmI），400RPM离心4min，制成待检载玻片，晾千。固定：4%中性甲醛滴加在已经离心处理过的载玻片上，覆盖全片，固定15分钟，用蒸馏水温和冲洗，室温待千。破膜处理：将固定好的玻片置于玻璃槽中，用新鲜配制的0.2%Triton-X100浸泡，刚刚没过玻片为宜，置于4℃冰箱30分钟，取出玻片，PBS缓冲液冲片，室温待千。

1.2.2 脑脊液细胞的收集

是脑脊液细胞学检查的前提和重要环节，只有收集到大量形态完整的细胞才能进行染色和分类诊断。目前脑脊液细胞的收集技术以细胞玻片离心沉淀法应用较广，其效果较理想。国产化的有FMU-5型脑脊液细胞玻片沉淀器、FCS型离心沉淀仪和合资的Cytospin细胞玻片离心沉淀仪等。上述各型收集器各自优点和不足。无论使用哪一种细胞收集器，必须符合一下要求：1.能够收集标本中较多的细胞，损失少;2.脑脊液量不需太多;3.收集过程既要快速又不损害细胞的形态和结构，细胞分布均匀，清晰;4.标本范围小，便于观察;5.能够耐受各种固定剂和染色剂;6.要求设备简单，便于操作，离心时间，速度和加速度可自控，且运转稳定不受电压变化影响;7.严格按照各型离心仪操作程序，特别注意离心仪不宜起动过猛或初速过快。由于这种突然的外力作用，常易导致脑脊液细胞的相互撞击或（和）撞向沉淀管的管壁，而造成不同程度的细胞破坏和变形。

2 结果

2.1 常见细胞染色分类情况和细胞形态细胞染

色后分类发现17例异常细胞，其中最常见的是转移癌细胞，胃癌转移细胞有5例，占29.4%（5/17），肺癌转移细胞4例，占23.5（4/17）;其次为淋巴瘤细胞3例，占17.6（3/17）。常见的转移性癌细胞、淋巴瘤细胞和脑膜白血病细胞形态见图1。113例患者中，淋巴细胞分类升高（>80%）有34例;单核细胞升高（>45%）有18例，1例出现嗜酸性粒细胞升高（>5%）。

2.2 细胞染色分类法与影像学检查

实体恶性肿瘤、淋巴瘤和白血病患者做细胞染色分类检查检出异常细胞的阳性率均高于相近时间段的头颅CT/MRI检查。特别是对于实体恶性肿瘤，细胞染色分类检查检出异常细胞的阳性率为71.4%（10/14）明显高于CT/MRI检查发现占位性病变的阳性率21.4%（3/14），两种检查方法有显著统计学意义（P=0.021）。

3 讨论

脑脊液细胞学检测是一种定量与定性方法相结合的诊断技术，其结果中包含的信息不单纯是有无炎症或有无肿瘤，神经科医师应结合患者临床表现，深入分析脑脊液细胞学检测结果，方可从中获得更多有价值的诊断信息。我国临床脑脊液细胞学检测的总体水平较高，与我们紧密结合临床的诊断方法不无关系。40年前，我国的脑脊液细胞学实验室检测首先是由神经科前辈引进和开展的，目前国内主要的脑脊液细胞学实验室多设立在神经科，许多脑脊液细胞学诊断是由神经科医师执行的。临床与脑脊液细胞学紧密结合的诊断方法和学术方向是我们的历史传统与现实优势，值得保持与发扬。同时，为了普及这一实用且价廉的诊断方法，促进其学术和技术水平的提高，期望临床检验科和病理科的更多同仁积极地参与此项工作。

参考文献

[1] 庞晓川，李琳，王永香，等.液基细胞制片联合巴氏染色观察实体瘤脑膜转移患者脑脊液中肿瘤细胞形态学特点[J].中国老年学杂志，2018，38（16）：3874-3878.

[2] 周雯雯，牛小青，王昭.慢性淋巴细胞白血病伴中枢神经系统浸润1例并文献复习[J].中国肿瘤临床，2013，40（22）：1400-1403.