邵敏敏　何福收　陈同　王春台　谭艳平

摘要 [目的]研究Nicotiana sylvestris和Nicotiana attenuata这2种烟草中sm-Nvas同源基因分别在经水杨酸（SA） 、甲基茉莉酸（MeJA）及伤诱导后的表达情况。[方法]采用Trizol法提取经水杨酸、甲基茉莉酸及伤处理后的2种烟草叶片的总RNA，转录成cDNA，利用实时荧光定量PCR检测sm-Nvas同源基因的表达量并进行数据分析。[结果]通过对烟草叶片中sm-Nvas同源基因的表达量分析，结果表明水杨酸、甲基茉莉酸及伤处理能对sm-Nvas同源基因的表达起调控作用。[结论]用SA、MJA和伤处理Nicotiana sylvestris和Nicotiana attenuata烟草，发现sm-Nvas的表达量均有所增加。在处理8 h后其表达量发生了明显的变化，在12～16 h其表达量的增加达到峰值。这对研究烟草的sm-Nvas及其同源基因的功能奠定重要的基础。

关键词 甲基茉莉;水杨酸;伤害处理;实时荧光定量PCR;sm-Nvas;同源基因;烟草

中图分类号 Q 786文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2020）16-0105-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.16.028

Effects of Salicylic Acid，Methyl Jasmonate and Wound Induction on the Expression of sm-Nvas Homologous Genes in Tobacco

SHAO Min-min，HE Fu-shou，CHEN Tong et al （School of Life Sciences，South-Central University for Nationalities，Hubei Provincial Key Laboratory of Characteristic Plant Germplasm Protection and Utilization in Wuling Mountains，State Key Laboratory of Biotechnology，Wuhan，Hubei 430074）

Abstract [Objective]To study the expression of sm-Nvas homologous genes in two tobaccos，Nicotiana sylvestris and Nicotiana attenuata，after salicylic acid （SA），methyl jasmonate （MeJA） and wounding induction，respectively.[Method]Total RNA was extracted from the  two tobacco leaves treated with SA，MeJA and wounding using Trizol method，and then reverse transcribed into cDNA.The expression of sm-Nvas homologous gene was detected by real-time fluorescence quantitative PCR and the data were analyzed.[Result]Based on analysis of the expression level of sm-Nvas homologous genes in tobacco leaves，it showed that salicylic acid，methyl jasmonic acid and wound treatment could regulate the expression of sm-Nvas homologous genes.[Conclusion]After SA，MJA and wounding treatment of Nicotiana sylvestris and Nicotiana attenuata tobacco，the expression of sm-Nvas homologous gene increased.After 8 hours of treatment，all the expression levels changed significantly，and reached the peak at about 12-16 hours.This will lay an important foundation for studying the function of sm-Nvas and its homologous genes in tobacco.

Key words Methyl jasmonic acid;Salicylic acid;Injury treatment;Real-time PCR;sm-Nvas;Homologous genes;Tobacco

基金項目 湖北省自然科学基金项目（2018CFB481）;中南民族大学研究生学术创新基金项目（2019sycxjj237）。

作者简介 邵敏敏（1990—），女，江苏南通人，硕士研究生，从事植物遗传学研究。*通信作者，副教授，硕士生导师，博士，从事烟草水稻功能基因的相关研究。

收稿日期 2020-02-24;修回日期 2020-03-26

烟草维管束发育相关基因sm-Nvas是一个受水杨酸（SA） 和甲基茉莉酸（MeJA）特异性诱导表达的基因。利用5′端缺失分析法把sm-Nvas基因启动子ATG+1～-463区域序列截成片段插入到含有GFP标签的双元表达载体中，转入W38型烟草植株。转基因烟草中的绿色荧光主要集中在维管束组织中表达，说明该基因特异表达于维管束中[1]。已经有试验表明把该基因导入到植物中，将导致转基因植株矮化、叶脉增多、茎和叶脉增粗等一系列表型变化[2-3]。……