魏丽荣，滕小艳，夏前林，杜玉珍,2

1.上海健康医学院附属第六人民医院东院检验科，上海 201306；2.上海市第六人民医院东院检验科，上海201306

肺癌是全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，导致其高病死率的主要原因是局部复发和远处转移，但目前肿瘤细胞的具体转移机制仍未完全明确［1］。肺癌等恶性肿瘤的转移与上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）的发生密切相关。斯钙素1（stanniocalcin 1，STC1）是一种激素类糖蛋白，以自分泌/旁分泌的方式产生效应。STC1的高表达与胃癌、结直肠癌、肝癌、乳腺癌等癌症的发展和不良预后相关［2-5］。在前期工作中我们发现，STC1蛋白在Ⅲ～Ⅳ期肺腺癌患者的血清和组织中显著升高，STC1过表达能够促进肺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡；此外，我们还发现，肺癌患者组织中的STC1蛋白水平与肺癌临床分期、淋巴结转移个数呈正相关［6-7］。但STC1对肺癌细胞转移的影响及其作用机制，目前还未完全阐明。本研究通过检测STC1对肺癌细胞EMT标志物的影响，以及细胞侵袭和迁移能力的改变，探讨SCT1在肺癌细胞EMT及转移中的作用机制。

1 材料和方法

1.1 材料与试剂

TRIzol试剂和LipofectamineTM2000购自美国Invitrogen公司；pBABE-puro反转录病毒载体、pUMVC和pCMV-VSV-G包装载体购自美国Addgene公司；胰蛋白酶消化液购自美国Solarbio公司；Transwell小室购自美国Corning公司；基质胶Matrigel购自美国BD公司；反转录试剂盒和蛋白预染Marker 购自加拿大Fermentas公司；实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）引物由上海捷瑞生物工程有限公司设计合成；SYBR Green PCR试剂盒和BCA蛋白定量试剂盒购自美国Thermo公司；RIPA组织细胞快速裂解液和30%丙烯酰胺（29∶1）购自美国Solarbio公司；……