田志美，宋崇富*，卢若雨，王标，薄连震，刘锐锐，蒋雪月，金晓艳

（1.阜阳师范大学 化学与材料工程学院，安徽 阜阳 236037；2.安徽恒宇环保设备制造股份有限公司，安徽 阜阳 236626）

脂肪酶（Lipase），又叫甘油脂水解酶，它是属于羧基酯水解酶类的一种有机相酶，可以作用于甘油三酯的酯键，将甘油三酯水解成甘油和脂肪酸[1-3]。脂肪酶可以用来催化一些有机化学反应。脂肪酶的运用非常广泛，主要在食品加工、油脂改性、皮革与造纸工艺和有机合成等方面[4-13]。酶的固定化技术可以有效解决它们在反应中导致的一系列问题，而且通过这种技术可以有效提高脂肪酶的活性[14-16]。脂肪酶性质的研究主要是利用分光光度法[17]探究最适温度及温度耐受检测、最适pH、底物特异性、反复操作后的稳定性等方面。来自Candida antarctica的固定化诺维信脂肪酶435(简称为N435)是一种有吸引力的生物催化剂，用于从许多类型的含油种子植物生产生物柴油[18]。N435是一种白色或微黄色的颗粒，由经过基因改性的米曲霉（Aspergillus oryzae)微生物进行深层发酵并吸附于大孔丙烯酸树脂而制成。

为了更好的以N435作为催化剂催化餐厨废油制备生物柴油，本论文拟利用分光光度法[19-20]以对硝基苯酚月桂酸酯（p-nitropHenyl laurate，简称为C12）为底物溶液对一种商用的固定化脂肪酶(N435)进行活性表征。其中主要关注最适温度及pH、各种试剂对酶活的影响，操作稳定性等，以期为生物柴油的制备条件的控制提供可行的参数。

1 实验部分

1.1 仪器、材料的准备和试剂的配制

1.1.1 仪器

722G型分光光度计，pHS-3C计(上海仪电科学仪器股份有限公司)；……