程 乾，周 婕，柴大飞△，郑骏年△

1.徐州医科大学 肿瘤研究所(徐州 221002)；2.徐州市科技情报研究所(徐州 221000)

肾癌在泌尿系统恶性肿瘤中发生率高居第3位，发病率在恶性肿瘤中占3%～5%[1]，25%～30%患者在就诊时出现转移[2]。由于肾癌对放、化疗不敏感，这使肾癌的临床治疗成为一大难题[3]，因此，需探索新的治疗肾癌方案应用于临床。索拉非尼作为一线治疗和免疫治疗失败病人二线治疗的靶向药，治疗转移性肾癌的多激酶抑制剂，对细胞具有抑制增殖、促进凋亡及对血管具有生成抑制等作用，疾病控制率和无进展生存期较好。但由于反应率低、药物抵抗性的原因，晚期肾癌患者的中位生存期也仅能延长17.8～24.2个月[4-5]，因此针对索拉非尼耐药性产生机制的方案探寻，是提高索拉非尼在中晚期肾癌疗效尤为重要的一环。缺氧是肿瘤细胞对药物治疗产生耐药的重要因素，在此环境下，缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor, HIF-1α)及HIF-2α蛋白表达增加、降解减少和稳定性提高，HIF能够促进细胞增殖与抑制凋亡、促进血管生成、促进细胞转移，对抗肿瘤药物有耐药作用[6-7]。本研究旨在探讨缺氧环境下，HIF-1α与HIF-2α的变化，以及敲减HIF-2α引起索拉非尼协同促进肾癌细胞凋亡的机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验对象 人肾癌细胞(OS-RC-2、786-O)购自中科院上海分院细胞库。

1.1.2 主要试剂 改良型RPMI 1640培养基(美国Hyclone公司，批号：NZG1090)；胎牛血清(美国Hyclone公司，批号：RB35932)；噻唑蓝(MTT)(合肥博美生物科技有限责任公司，批号：MTO792)；BCA试剂盒(中国Solarbio公司，货号：PC0020)；流式凋亡试剂盒(江苏凯基生物公司，批号：20191003)。慢病……