赵倩如，朱丽英，赵权宇，江 凌

(1.南京工业大学 生物与制药工程学院，江苏 南京 211800；2.南京工业大学 化学与分子工程学院，江苏 南京 211800；3.南京工业大学 食品与轻工学院，江苏 南京 211800)

近年来,过敏性疾病的发病率不断增加，食物过敏已成为一个重要的公共卫生问题。牛乳过敏(CMA)是一种最常出现的食物过敏反应[1]，占所有确诊食物过敏病例的9%[2]，婴儿牛乳过敏发病率从0.3%到7.5%不等[3]。牛乳过敏是由牛乳中的致敏蛋白引起的一种不良反应，主要由免疫球蛋白介导的免疫反应，可引起过敏性鼻炎、哮喘、湿疹、腹泻、胃肠出血等症状，甚至会导致过敏性休克，严重危及婴幼儿的生命[4]。牛乳中最具有营养价值的蛋白质是乳清蛋白，乳清蛋白中主要的致敏蛋白是α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。

目前检测乳品中过敏原的方法主要有3种：高效液相色谱法(HPLC)、电泳法、免疫化学法。最常见的蛋白电泳方法是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)[5-7]和毛细管电泳法[8]以及酶联免疫吸附(ELISA)法[9-10]通过抗原抗体特异性结合可以测定过敏原的免疫反应性(与免疫球蛋白结合的能力)。但以上方法在测定β-乳球蛋白时都具有一定的局限性,如电泳技术在定量方面有很大的不足；毛细管电泳重复性差，容易堵塞；ELISA方法对试剂的选择性高。牛乳中蛋白质种类很多，很难有效检测，以上技术局限性限制了这些方法在实践中的推广应用。反相高效液相色谱法是分析乳清蛋白成分的有效方法之一，与其他检测方法相比具有分辨率和回收率高、操作简便、重复性好等优势。……