王素华，袁淑辉，帅江冰，王忠才，蔡 军，赵治国

（1. 温州海关综合技术服务中心，浙江 温州 325027；2. 杭州海关技术中心，浙江 杭州 310016； 3. 呼和浩特海关技术中心，内蒙古 呼和浩特 010020）

炭疽杆菌（Bacillus anthracis）是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，可引起人畜共患的炭疽病，是世界动物卫生组织（OIE）确立的必须通报的动物疫病。炭疽杆菌具有高致病性，对人和动物的健康和生命构成极大威胁，常被用作生物恐怖战剂，其快速而精确的检测一直备受重视[1]。目前炭疽杆菌检测的常用方法，主要是对病原体进行培养、染色镜检、血清学（抗原或抗体）检测等，但这些检测方法耗时较长，难以适应快速诊断和控制疫情的需要。

重组酶聚合酶扩增技术（Recombinase polymerase amplification，RPA）是一种新型的等温扩增技术[2]。RPA 主要依赖于重组酶、聚合酶、单链结合蛋白等实现对靶基因的等温扩增。在反应过程中，重组酶结合引物形成蛋白-DNA 混合物并启动寻找模板DNA 上的同源序列。同源序列定位后，则会引发链置换反应，引物结合到对应模板上，聚合酶进而从引物3'末端开始启动DNA 合成。同PCR 一样，两条引物可以启动对靶基因的对数级扩增[2]。本研究以炭疽杆菌BA5345 基因为研究对象，设计特异性引物，建立了能够快速、有效检测炭疽杆菌的RPA 等温检测方法，旨在为炭疽的防控和诊断提供一种新的、可靠的技术支持。

1 材料与方法

1.1 菌株及临床样品炭疽杆菌疫苗株（A16R）购自兰州生物制品有限公司； 蜡样芽孢杆菌（BNCC124613）、苏云金芽孢杆菌（BNCC221700）、蕈状芽孢杆菌（BNCC184427）和魏氏芽孢杆菌（BNCC189983）购自国家兽医微生物菌种保藏中心；……