李洋洋，宗 扬，程 健，王亚杰，张鑫宇，夏晓莉，孙怀昌,2*

（1. 扬州大学 兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心，江苏 扬州 225009；2. 江苏农牧科技职业学院 江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏 泰州 225300）

猪 圆 环 病 毒2 型（Porcine circovirus type 2，PCV2）是猪圆环病毒相关疾病（Porcine circovirus-associated disease，PCVAD）的主要病原，目前在世界范围内流行，给养猪业国家造成很大的经济损失[1]。该病主要靠疫苗接种进行控制，可用疫苗包括灭活苗、重组亚单位疫苗和病毒样颗粒（Virus-like particle，VLP）疫苗，但均需与免疫佐剂配合使用。尽管油乳剂等传统免疫佐剂相对安全，但不能有效诱导抗病毒感染重要的细胞免疫应答。新型水包油包水佐剂的免疫佐剂活性较全面，但使用成本较高[2]。因此，新型免疫佐剂研制是预防兽医学的重要研究课题。

Toll 样受体（Toll-like receptor，TLR）是一类重要的模式识别受体，通过与病原相关分子模式结合能刺激细胞因子产生和促进抗原提呈细胞活化，在先天性和获得性免疫中发挥重要的桥梁作用，因此TLR 配体是很有开发前景的新型免疫佐剂[3]。本实验室在前期研究中以类弹性蛋白多肽（Elastin-like polypeptide，ELP）为融合标签，在重组大肠杆菌中表达了PCV2 Cap 蛋白，纯化的ELP-Cap 融合蛋白能形成典型的VLP，具有较强的免疫原性，有望作为PCV2新型亚单位疫苗被进一步开发。细菌脂蛋白、鞭毛蛋白和热应激蛋白分别是TLR2、TLR5和TLR2/4的配体，也是很有应用前景的新型分子佐剂[4]。为了研制PCV2 VLP 候选疫苗的新型佐剂，本研究利用重组大肠杆菌分别表达了脑膜炎奈瑟菌Ag473 脂蛋白、创伤弧菌FlaB 鞭毛蛋白和结核分枝杆菌热应激蛋白70（Hsp70），并将这些重组蛋白分别与PCV2 VLP 候选疫苗混合进行小鼠免疫试验，旨在筛选获得合适的分子佐剂。……