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A 型流感病毒NP 蛋白双单抗夹心ELISA 检测方法的建立

2020-08-06张振宇于萌萌王晓钧

中国预防兽医学报 2020年6期
关键词:检测方法

徐 菱,张振宇,郭 兴,于萌萌,王晓钧

(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/马传染病和慢病毒病研究创新团队,黑龙江 哈尔滨 150069)

流感病毒属于正粘病毒科(Orthomyxoviridae)流感病毒属。根据病毒核蛋白(Nucleoprotein,NP)和基质蛋白(Matrix,M)的特性,流感病毒可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)和丁(D)4 个亚型[1]。A 型流感病毒(Influenza A virus,IAV)基因组由8段负链RNA组成,编码10个病毒基本蛋白,以及一些mRNA剪切形成的辅助蛋白[2-3]。由于IAV的抗原性极易发生变异,形成新的流感病毒变异株,从而导致病毒的耐药性不断增强,短时间内能够造成流感的区域性甚至全球性大流行[4]。据统计,在人类历史上,至少发生过4 次全球范围内的流感大流行。其中包括:1918 年的西班牙流感(H1N1)、1957 年的亚洲流感(H2N2)、1968 年的香港流感(H3N2)、2009 年的墨西哥流感(H1N1),仅在西班牙流感大流行中,造成的死亡人数高达5 000 万人,可见流感对全世界人类公共卫生安全的危害。我国是流感的高发区,也是流感病毒易发生变异的地区之一。近年来流感频发,严重威胁公共卫生安全,所以建立IAV 方便、快速、准确的检测方法,对A 型流感的临床诊断以及流行病学研究具有重大意义[5]。

NP 蛋白是由IAV 基因组中第5 节段RNA 编码,包含498 个氨基酸,分子量为56 ku,是高度保守的结构蛋白,与病毒RNA 基因组及病毒RNA 聚合酶(PA、PB1、PB2 蛋白)相互结合构成流感病毒核糖核蛋白复合体,参与流感病毒遗传物质的复制、转录和组装[6]。NP 蛋白含有各亚型流感病毒共有的表位,可诱导交叉反应抗体和T 细胞反应,为CD8+T细胞主要识别的内部病毒抗原,常用于流感的免疫诊断和新型流感疫苗的研究开发的靶标[7-8]。……

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