郑云鹏 李旭阳 蔡丙杰 李冬芹 尹光文

郑州大学第一附属医院皮肤科450052

皮肤鳞状细胞癌（简称皮肤鳞癌）是一种常见的皮肤恶性肿瘤，部分患者可发生快速转移，影响皮肤外观和预后［1-4］。早期快速准确地控制肿瘤进展对患者具有重要意义。长链非编码RNA（long noncoding RNA，lncRNA）和微小RNA（microRNA，miR）均为常见的非编码RNA（non-coding RNA，ncRNA），其在机体癌症中的促进功能或者抑制功能均已得到很多研究的认可［5-6］。lncRNA LEF1-AS1 在多种癌症中均已有研究报道，但是在皮肤鳞癌中的功能及机制尚不清楚。本实验通过生物信息学预测LncRNA LEF1-AS1 的靶向miRNA，发现LncRNA LEF1-AS1 与miR-612 有结合位点，且研究报道LncRNA LINC00460通过使miR-612海绵化可促进头颈部鳞癌细胞的增殖，迁移和侵袭［7］。但miR-612在皮肤鳞癌中的功能尚不清楚。本研究以皮肤鳞癌细胞SCC13 为研究对象，检测lncRNA LEF1-AS1、miR-612的表达，观察干扰lncRNA LEF1-AS1、miR-612的表达对其增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。

材料与方法

一、实验材料

收集郑州大学第一附属医院2018 年3 月至2019 年6 月外科手术切除的20例皮肤鳞癌及对应的癌旁组织。本研究符合2013 年修订的《赫尔辛基 宣 言》（https：//www.wma.net/policies-post/wmadeclaration-of-helsinki-ethical-principles-for-medicalresearch-involving-human-subjects/）的要求，所有受试者均签署知情同意书。

SCC13细胞（编号：CVCL_4029）购自美国模式培养物集存库。实时荧光定量逆转录PCR（qRTPCR）检测试剂盒、反转录试剂盒（日本Takara 公司）；LipofectamineTM2000 脂质体转染试剂盒（美国Invitrogen 公司，规格：1.5 ml）；CCK8 细胞计数试剂盒（日本同仁化学研究所）；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素和碘化丙锭（Annexin V-FITC/PI）双染细胞凋亡检测试剂盒（南京诺唯赞生物科技有限公司）；迁移实验（Transwell）小室（美国Corning 公司）；双荧光素酶报告基因检测试剂盒（美国Promega 公司）。 流 式 细 胞 仪（Cytomics FC 500，美 国BECKMANCOULTER公司）。……