肖学敏 何艳艳 徐浩翔 王宝玺 林立航

1福建医科大学附属协和医院皮肤科，福州350001；2中国医学科学院 北京协和医学院皮肤病医院，南京210042；3中国医学科学院 北京协和医学院 整形外科研究所皮肤科，北京100144

反常性痤疮（acne inversa，AI；OMIM 142690），又称化脓性汗腺炎，是一种好发于皱褶部位的慢性复发性炎症性皮肤病。2010 年，王宝玺等［1］首先发现编码γ 分泌酶（γ-secretase，GS）不同亚单位的基因突变可引起部分家族性AI 的发生。γ分泌酶包含4 个必要组分，分别为早老素1（presenilin-1，PSEN1）、nicastrin 蛋白（NCSTN）、前咽缺陷蛋白（anterior pharynx defective-1，APH1）和早老素增强子2（presenilin enhancer-2，PEN2）。目前已在AI患者的γ分泌酶基因上发现41个不同的突变位点，其中NCSTN 基因突变27 个，均为功能缺失性突变［2-3］。NCSTN 亚基属于Ⅰ型跨膜糖蛋白，参与γ分泌酶的组装、成熟及稳定，此外还具有募集γ 分泌酶底物的功能，其表达异常可导致γ分泌酶活性和功能受损［4］。目前认为毛囊栓塞为AI 的初始及最主要致病因素，NCSTN 基因功能缺失性突变导致γ分泌酶-Notch信号通路表达及活性受损，进而影响角质形成细胞正常增殖和分化，可能在AI 的发病中发挥重要作用［5］。然而近期的研究显示，某些NCSTN 基因的功能缺失性突变并不影响Notch信号通路的正常活化，说明可能还有其他增殖和分化相关的细胞信号通路参与AI 发病［6］。我们通过沉默人永生化角质形成细胞HaCaT中NCSTN基因的表达，研究其下游细胞增殖及分化相关信号通路的改变。

材料和方法

一、材料

1.主要试剂和仪器：人永生化角质形成细胞株HaCaT 细胞源自美国ATCC 细胞库。胎牛血清、DMEM 培养基、0.25%胰酶（美国GIBCO 公司）；……