张晨晨，蔡泽宇，王 弦，江冬瑞，吴 强,3，王 晶

在女性常见肿瘤中卵巢癌的死亡率居高不下[1]，其中卵巢浆液性肿瘤死亡率占卵巢癌死亡率的70%[2]。因早期卵巢癌临床症状不明显，导致大多数患者无法得到较好的治疗效果[3]。截至目前，国内外对于卵巢癌的研究多数以商品化的细胞株为材料[4-5]，但相比之下原代培养的肿瘤细胞离体时间短，生物特性更接近体内状态，对卵巢癌防治的研究更有参考价值[6-7]。

目前国内对于人卵巢浆液性腺癌原代细胞(human ovarian serous adenocarcinoma cells, HOSACs)的培养常用组织贴壁法[8]，但这种原代培养方法周期长、容易污染且成功率低，限制了其在卵巢癌领域的研究。该试验通过改良酶的类型选择和消化时间，成功建立一种快速高效的HOSACs培养方法。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1标本 收集2018年1月～2019年5月安徽医科大学第一附属医院卵巢肿瘤减灭术的新鲜人卵巢浆液性腺癌标本25例，所有病例均经病理学诊断证实。所有患者在手术前未曾接受过化疗或放疗。依据最新的国家综合癌症网络(NCCN)指南，患者均为ⅡB～ⅢC期。上述组织标本的获取已由患者家属同意捐赠，并签署知情同意书，经医院医学伦理委员会批准。

1.1.2主要试剂 DMEM高糖培养基、磷酸盐缓冲液(PBS)购于美国Hyclone公司；0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA、胎牛血清(FBS)购于美国BI公司；透明质酸酶购于北京索莱宝科技有限公司；细胞无血清冻存液购于苏州新赛美公司；青霉素-链霉素购于上海赛默飞世尔公司；表皮生长因子(epidermal grow factor，EGF)购于美国PeproTech公司；CCK-8试剂盒、细胞角蛋白CK7抗体、DAPI 购于上海碧云天科技公司。……