徐 峰，胡珊珊，谢时帅1,，牛万祥1,，董永飞1,，程传东1,，牛朝诗1,

神经胶质瘤生长迅速、侵袭能力强，这可能与恶性肿瘤中存在缺氧/复氧微环境有关[1]。恶性胶质瘤一经确诊，以手术切除为主，放化疗为辅，总体治疗效果不佳。近年来，Germano et al[2]研究发现胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)大量存在于神经胶质瘤中，它能在胶质瘤中发挥重要作用(如恶性增殖、侵袭和肿瘤血管生成等)。GSCs大多数存在于干细胞巢中，在胶质瘤的缺氧微环境中发挥保护作用。Bao et al[3]通过研究发现GSCs能分泌血管内皮生长因子(vascular epidermal growth factor,VEGF)促进肿瘤周围的血管内皮细胞(human brain mircrovascular endothelial cells，HBMECs)大量增生，抑制其凋亡。研究[4]表明，肿瘤细胞分泌的外泌体囊泡可以在细胞与细胞之间转运如生长因子之类，从而发挥物质交换及信息传递等作用。该研究旨在探讨在体外实验中，GSCs来源的外泌体是否对缺氧/复氧损伤的血管内皮细胞有保护作用。

1 材料与方法

1.1 材料HBMECs购自美国ScienCell公司；人来源U87胶质瘤细胞株购自中科院上海细胞库。无外泌体血清购自美国SBI公司；一抗(von Willebrand factor,Vwf)购自武汉博士德公司；FITC标记的二抗(羊抗小鼠)和FITC标记的驴抗兔购自美国Jackson公司；Neun抗体购自美国Millipore公司；DMEM、1640细胞培养液、DMEM/F-12细胞培养液、B27添加剂 、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和表皮细胞生长因子(epidermal growth factor,EGF)均购自美国Gibco公司；BCA试剂盒购自上海雅酶生物科技有限公司；辣根酶标记山羊抗小鼠IgG购自北京中杉金桥生物技术有限公司；化学发光显影液购自美国MILLIPORE公司；GFAP单克隆抗体购自美国Novus Biologicals公司；CDl33单克隆抗体及CD63小鼠单克隆抗体购自英国Abcam公司；……