提高间充质干细胞表面CXCR4 表达的实验研究*
2020-07-08路海苏胡书群吕兰欣
李 蓉 ,路海苏 ,胡书群 ,吕兰欣 ,2
(1 徐州医科大学,江苏221002;2 徐州医科大学附属医院急救中心)
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞[1]。干细胞在多种疾病中已获得研究和应用,如烧伤、骨创伤、骨肿瘤、血管再生及修复、神经再生及修复、角膜修复、肝脏、肺、心肌修复等[2-3]。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有易分离、扩增以及体外操作简便等特点,在组织工程、细胞移植、基因治疗等领域的应用前景十分广阔[4]。MSCs 迁移至受损部位进行细胞替代,并分泌各种因子,帮助受损部位重建功能[5-6]。
多种趋化因子、生长因子及黏附分子对MSCs具有趋化作用,引导其向损伤区及其邻近组织迁移,即干细胞归巢[7]。干细胞的归巢率在组织损伤治疗中有着重要意义。基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及其趋化因子受体-4(CXCR4)在MSCs 迁移中发挥重要作用[8-10]。研究发现,MSCs 表面存在趋化因子受体CXCR4 和 CX3CR1,损伤区域 SDF-1α 和 fractalkine等趋化因子表达增加,作用于移植细胞表面受体,引导其向缺血病灶迁移[11]。然而体外培养的MSCs 在传代过程中,其表面CXCR4 受体逐渐减少,导致MSCs移植后归巢效率低下,难以发挥应有作用[12-13]。因此,提高MSCs 体外培养过程中CXCR4 受体的表达效率在细胞治疗中至关重要。
1 材料与方法
1.1 材料 兔骨髓间充质干细胞(赛业生物);人脐带间充质干细胞(顺昊生物);胎牛血清(FBS)(BI);CCK-8 试剂盒(VICMED);兔源 CXCR4 一抗(Abcam);Alex594-抗兔二抗(Life Technology);细胞培养相关试剂(Hyclone)。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养:将兔骨髓间充质干细胞(Rabbit-MSCs)与人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)用含有10%胎牛血清的 L-DMEM 重悬,于 37 ℃、5% CO2培养。……
