朱亚男 秦宝福

摘要：目的：分析枳实黄酮对照提取物研究及其在枳实药材质量控制中的运用。方法：对枳实黄铜中的二氢黄酮类及挥发油类的分离进行分析。根据芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷的线性关系，对其质量控制进行分析。结果：通过枳实黄酮对照提取物的研究分析，芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷在各自范围内的峰面积良好，测定系数在0.95以上。结论：通过枳实黄酮对照提取物的枳实质量控制方法分析，可以有效提高枳实药材质量的控制效果，而且也可以为中药材料的制备及使用提供支持。

关键词：枳实黄酮;对照提取物;枳实药材;质量控制

枳实作为传统的中药，主要是芸香料植物酸橙的干燥幼果，其在中医范畴中具有治疗饮食积滞、直肠或是子宫脱垂的问题。而黄酮类化合物作为植物中一类有活性的二级代谢产物，在芸香柚皮苷那种广泛存在，可以对肠平滑肌有双向性的调节作用，对维生素C起到保护作用，而且也会影响人体的内分泌及代谢情况，安全性较高。研究中，为了更好地提高枳实的质量控制，选择芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷制备柚皮苷黄酮对照提取物，分析枳实黄酮对照提取物研究及其在枳实药材质量控制中的运用价值，具体结果如下：

1 枳实黄酮及提取方法

1.1 枳实黄酮

所谓枳实黄酮主要是指含有脂溶性柑橘类的生物黄铜，其中的脂溶性柑橘类黄酮存在着柑橘类所特有的聚甲氧基类黄酮类，其比其他类的黄酮活性强，将其运用在中医领域治疗中，可以达到积滞内停、痞满胀痛、泻痢后重、大便不通的目的。其理化性质如下：第一，黄酮类化合物多数为结晶性的物质，少数为无定型的粉末，大部分中含有酚羟类物质，而且，在分子中通常存在着碳基，其位置与交叉共轭，构成了黄酮类的化合物质。第二，对于枳实黄酮中的黄酮苷元物质，分子成分中含有双氢黄酮、黄烷醇等。第三，由于黄酮类化合物存在着较强的荧光特点，在紫外灯的环境下呈现出黄绿以及暗棕色的特点。第四，枳实中的二氢黄酮类以及挥发油类具有一定的抗抑郁以及促进胃动力的作用，将这种物质运用在中药疗中，会实现抗菌、抗病毒，以及抗炎等治疗的目的，充分满足中药使用及治疗的需求。

1.2 枳实黄酮的提取方法

1.2.1水提法

在黄酮类营养物质提取中，通过水提法可以提高物质的提取质量。在水提法使用中，应该充分考虑到水量、提取温度以及提取时间等。对于该种提取方法而言，存在着工艺成本低以及安全性高的优势，但是，由于水的极性大，容易将物质中的蛋白质以及糖类溶解，容易出现腐蚀的问题。因此，在枳实黄酮提取中，应该根据实验的特点以及操作环境，合理选择提取技术。

1.2.2碱性水或碱性西醇提取法

通过对黄酮类化合物的分析，其存在着较多的酚羟基，通过碱性水或碱性稀释提纯，可以得到氢氧化钠以及石灰水氢氧化钙等水溶液，但是，在该种提纯方法使用中，存在着杂质较多的问题，不利于达到纯化的目的。而通过石灰水的使用，可以增强物质纯化的处理效果。

1.2.3有机溶剂提取方法

对于这种方法而言，主要利用乙醇，甲醇等物质，这些物质对设备的要求简单，而且单率较高，在具体的运用中，会使用冷浸法以及回流法，在不同原料情况下获取的结果有所不同。

1.2.4酶法提取工艺

对于该种技术而言，主要是在传统提取工艺上所形成的，利用植物药材细胞壁的组成成分以及与酶反应高度专一的特点，通过酶的融合，可以有效将细胞壁的成分溶解，從而达到提纯的目的。

2 实验仪器

本次实验使用的器材包括：循环水式多用真空泵;数控超声波清洗器;高效液相色谱仪;稳定性试验箱;Sunfire C18色谱柱（4.6mm250mm，5m）;Sartorious BT25S型十万分之一电子分析天平[1]。

材料包括：芸香柚皮苷、柚皮苷对照品、橙皮苷对照品、甲醇等。

3 实验方法及结果

3.1 对照物提取标定

（1）使用Sunfire C18色谱柱，利用流动相位甲醇-水-乙醇，流速始终保持在1mL/min，柱温度为35℃，进样量均为10L。

（2）对照品的溶液制备中，将不同对照品种加入甲醇，选择相通质量的对照品进行溶液制备。例如，1ml的芸香柚皮苷加入甲醇后得到的溶液为20.34g、1ml的柚皮苷加入甲醇后得到的溶液为20.59g[2]。

（3）供试品的溶液制备

选择枳实黄酮对照提取物（15mg），精密称定结束后放在25ml的容量瓶之中，之后利用甲醇进行超声波处理，维持时间为10min，最后使用甲醇稀释并摇匀。

4 对照提取物标定

选择枳实黄酮对照提取物（S1、S2、S3），得到芸香柚皮苷、柚皮苷以及橙皮苷的含量如表1所示[3]。

4.1 对照提取物在枳实药材中的质量控制

通过对枳实黄铜对照提取物对其在枳实药材中的质量控制进行分析。

（1）对照提取物溶液制备

选择枳实黄酮对照提取物，对其进行精密的测定，将22.50mg的提取物放置在50ml的容量瓶之中，通过甲醇处理，将溶液稀释到刻度状态并摇匀，之后按照同样的方法进行芸香柚皮苷以及柚皮苷等溶液的提取。

（2）供试品溶液的制备

通过对枳实药材制备状况的分析，应该使用50mg的枳实药材粉末加入70%的乙醇，之后利用超声波进行处理，之后在进行质量的称定。

（3）线性分析

在枳实黄酮对照提取物的质量控制中，需要精密提取36.75mg的对照物放在25ml的容器瓶之中，并加入甲醇，将其溶解到固定刻度之后摇匀处理。之后按照同样的方法制备对照提取物溶液[4]。

芸香柚皮苷的线性回归方程为：Y=1.584106X-1.152104，r=0.9999，其中的线性范围在0.0358-0.2760g的范围内。

橙皮苷的线性回归方程为：Y=1.6847106X+4.060103，r=0.9995。其中的线性范围在0.1072-0.5360g的范围内。

（4）精密度分析

枳实药材粉末50mg，对其进行精密称定，之后计算色谱峰峰面积，结果分别为0.82%、1.08%以及1.22%。

（5）重复性考察

在重复性考察及实验的过程中，应该按照芸香柚皮苷、柚皮苷以及橙皮苷测定含量，同RSD计算方法的运用，得到重复性的考察结果为1.95%、1.74%以及1.88%。

（6）枳实药材含量的测定

在枳实药材测定中，需要对精密度进行称定处理，并按照植被供试品对枳实黄铜进行对照，利用OriginPro9.1统计软件可以发现，芸香柚皮苷、柚皮苷以及橙皮苷的系数均大于0.95，表面该种测定方法具有一致性。因此，在枳实黄铜对照物提取物分析中，可以代替单体对照品评价枳实药材的质量。

5 结果

通过对实验过程的分析可以发现，70%的乙醇提取物加水分散后存在着不溶物，通过HPLC含量的测定，发现水不溶物中的柚皮苷含量相对较高。在对单体对照品以及枳实黄酮对照提取物的对比中，通过对不同色谱柱Sunfire C18的分析，不同流动相中的枳实黄酮色谱峰值的影响结果不同，在使用HPLC含量测定中，具有准确度高以及稳定性强的检测优势。

6 结语

枳实运用在中医范畴中，可以治疗积滞内停以及大便秘结的问题，枳实中的二氢黄酮类以及挥发油类具有一定的抗抑郁以及促进胃动力的作用，因此，在枳实药材质量控制的过程中，应该根据枳实药材的特点，仔细分析药物的属性及基本特征，将二氢黄酮类成分的含量作为核心标准，以便更好地控制藥材的质量，规范中药管理的可行性及质量性，充分发挥枳实药材的安全价值。

参考文献：

[1]贾富霞，王秀娟，罗容.酸橙枳实HPLC指纹图谱方法研究及6种黄酮类药效组分的含量测定[J].中华中医药学刊，2016（12）：103-106.

[2]王章伟，王振，邱小燕.HPLC法同时测定枳实总黄酮苷提取物中3个香豆素类成分含量[J].江西中医药，2018，（11）：57-60.

[3]李晓婷，李纯.基于有效物质基础的枳实药材的质量控制体系研究[J].北京中医药大学学报，2013（10）：696-700.

[4]陈建真，袁华，陈彬.枳实和枳壳中黄酮苷类成分的比较研究[J].中国中医药科技，2015（5）：53-54.