吴新竹,查琳,马旺生,李慧

支气管哮喘是一种以儿童多见的异质性慢性呼吸道疾病，以慢性气道炎性反应和气道高反应为主要临床特征，其发病时会对自身肺功能造成一定程度的损伤，主要表现为喘息、气促、咳嗽及胸部紧迫感等，对患者生活质量及身心健康造成严重影响[1]。目前，临床对于哮喘的发病机制尚未有权威性解释，一般认为其是以气道反应为基础的过敏性疾病。而炎性因子具有上调IgE、诱导气道炎性细胞浸润及激活多种信号通路等功能，在哮喘疾病的发生发展过程中起着至关重要的作用[2-3]。多项研究显示，维生素D(VitD)与药物反应、病情严重程度及哮喘的发生关系较为密切[4-5]。有报道指出，哮喘儿童VitD水平与其激素耐药、气道高反应及肺功能受损程度存在一定的相关性[6]。目前临床上对VitD与肺功能、炎性反应及哮喘控制的相关性研究较少[7]。故本研究探讨哮喘儿童血清VitD水平改变与炎性因子、免疫功能及肺功能相关性，为其临床诊治提供参考，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017年2月—2019年3月武汉科技大学附属普仁医院儿科收治的120例哮喘儿童患者作为研究对象，并根据患者血清VitD水平将其分为正常组(>30 ng/L,n=28)、不足组(20～30 ng/L,n=67)及缺乏组(<20 ng/L,n=25)[4]。其中正常组男23例，女5例，年龄2～9(5.32±0.26)岁；不足组男55例，女12例，年龄1～9(5.29±0.33)岁；缺乏组男21例，女4例，年龄1～8(5.23±0.39)岁。3组患者在性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审批通过，患儿家属知情同意并签署知情协议书。

1.2 纳入和排除标准 纳入标准：(1)符合哮喘的诊断标准[8]；(2)无哮喘家族史；(3)发作时，在其双肺部均可闻及弥散性或散在哮鸣音(以呼气相为主)，呼气相相对延长；(4)反复发作性咳嗽、胸闷、气促及喘息，多与冷空气、病理性上呼吸道感染、接触变应原及化学性刺激有关；(5)体征及症状可自行缓解或经治疗后缓解；(6)临床症状不典型者应具备支气管舒张试验或激发试验至少1条试验阳性。排除标准：(1)合并有免疫缺陷性疾病、活动性佝偻病后遗症、肝肾功能异常、自身免疫性疾病、甲状腺疾病及恶性肿瘤者；(2)合并个人及家族过敏史及相关变态反应者；(3)入组前3个月经过钙制剂及维生素治疗者；(4)长期使用糖皮质激素治疗者；(5)不能完成肺功能检查者；(6)非典型哮喘及感染后咳嗽者，其他疾病引发的咳嗽、胸闷、气促及喘息等；(7)依从性差，中途退出者。

1.3 治疗方法 所有患者均给予解痉平喘化痰、吸氧补液等常规治疗，给予布地奈德(鲁南贝特制药有限公司)雾化吸入治疗，200 μg/次，早晚各1次；同时进行维生素AD滴剂(山东达因海洋生物制药股份有限公司)治疗，1粒/次。

1.4 检测指标与方法

1.4.1 血清VitD水平测定: 抽取患儿入院后第2天08：00空腹静脉血5 ml，3 000 r/min离心10 min，分离得到血清，冰箱-75℃条件下保存，待测。采用化学发光法对血清VitD水平进行测定。

1.4.2 肺功能检测: 采用肺功能测定仪(德国 MS-DIFFUSION)对患者肺功能指标进行测定。检测指标包括第一秒用力呼气容积(FEV1)、呼气流量峰值(PEF)、用力肺活量(FVC)。根据患者情况进行3～5次测定，记录最佳值。

1.4.3 血清免疫功能指标检测: 采用免疫透射比浊法对患者免疫球蛋白(IgA、IgE、IgG)水平进行测定，试剂盒购于上海恒远生物科技有限公司，操作方法严格按照说明书执行。

1.4.4 血清炎性因子水平检测: 采用酶联免疫吸附法对患者血清γ-干扰素(INF-γ)、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平进行测定，试剂盒购于北京荣志海达生物科技有限公司，操作方法严格按照说明书执行。

1.5 哮喘控制评估标准 参考2016版“儿童支气管哮喘诊断与防治指南”中相关规定[8]。6岁以下患者评估内容如下：(1)发病后活动受限；(2)使用治疗急性症状的缓解药物超过1次/周；(3)夜间因哮喘憋醒；(4)日间症状不小于1次/周。6岁以上患者评估内容如下：(1)发病后活动受限；(2)夜间睡眠有因哮喘憋醒者；(3)使用治疗急性症状的缓解药物超过2次/周；(4)日间症状不小于2次/周。患者1个月内未出现上述症状记为控制良好，出现1～2项为部分控制，3～4项为未控制。总控制率=(部分控制+控制良好)/总例数×100%。

2 结 果

2.1 哮喘控制程度比较 3组患者哮喘控制程度差异具有统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 3组患者哮喘控制程度比较 [例(%)]

2.2 血清炎性因子水平比较 3组患者血清INF-γ、IL-6、TNF-α水平差异具有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 3组患者血清炎性因子水平比较

2.3 免疫功能指标比较 3组患者血清IgA、IgG、IgE水平差异具有统计学意义(P<0.01)，见表3。

表3 3组患者免疫功能指标比较

2.4 肺功能指标比较 3组患者肺功能指标FEV1、PEF及FVC差异无统计学意义(P>0.05)，见表4。

表4 3组患者肺功能指标比较

2.5 相关性分析结果 经Pearson相关性分析显示，哮喘儿童血清VitD水平与血清INF-γ、IL-6、TNF-α、IgE呈负相关，与血清IgA、IgG及哮喘控制程度呈正相关(P<0.05)；与FEV1、PEF及FVC肺功能指标无相关性(P>0.05)，见表5。

表5 哮喘儿童血清VitD水平改变与炎性因子、免疫功能及肺功能相关性分析

3 讨 论

VitD是人体重要的活性成分，正常情况下，VitD经肝脏和肾脏分解形成活性相对较高的25(OH)D3，从而发挥重要的生物学作用[9]。25(OH)D3在人体中主要对钙磷代谢进行调节，在骨骼重塑过程中起着重要的作用[10]。近年研究显示，除调节钙磷代谢外，25(OH)D3还对B淋巴细胞和T淋巴细胞具有较好的调节效果，影响免疫功能[11]。本研究结果显示，哮喘患儿血清VitD水平相对较低，与秦晨光等[12]研究结果相符合。提示VitD可能在哮喘疾病的发生、发展过程中起着重要的作用。分析两者之间的关系，其原因可能是少部分患儿为过敏性体质，对多种食物中的VitD无法充分摄取，引起体内缺乏VitD；另外，哮喘患儿由于疾病的因素，外出活动时间相对较少，每天的日光照射量不足，造成机体VitD合成量相对较低[13-14]。

本研究结果显示，哮喘患儿的肺功能与血清VitD水平之间无相关性，与魏杰男等[15]研究结果相符合。这可能是由于VitD对哮喘患者平滑肌细胞的收缩性进行影响，造成其气道重塑[16]；VitD还具有潜在的生物活性，可以通过对促炎因子和抑炎因子的释放进行调节，从而控制机体炎性反应；另外，哮喘患儿大部分出现一定程度的气道损伤[17]。研究结果还显示，哮喘患儿病情的控制情况、炎性因子与其血清VitD水平存在较为密切的关系。这可能是由于VitD对IL-4、IL-10、IL-12及IgE的分泌具有调节作用，可有效减轻气道炎性反应；VitD可以对炎性因子进行调节，增强机体免疫耐受性，减轻体内炎性反应[18]；在机体固有免疫过程中，VitD可以对单核巨噬细胞产生作用，从而影响宿主的防御功能，当机体VitD缺乏时，可诱导INF-γ、IL-6、TNF-α等炎性因子的分泌；VitD还可对肺泡上皮细胞中的DNA合成产生一定的促进效果，有利于肺部和支气管的发育，促进肺部成熟[19]。本研究结果显示，哮喘患儿的免疫功能与血清VitD存在一定的相关性。这可能是由于VitD可增强机体对微生物多肽表达，提高呼吸道的防御能力；对中性粒细胞和吞噬细胞的吞噬作用具有促进作用，有效增强自然杀伤细胞的活性[20]；纠正CD8+和CD4+平衡，促进淋巴细胞增殖；同时对细胞介导的免疫反应具有较强的调节和刺激作用，从而调节免疫功能[21]。

综上所述，哮喘儿童血清VitD水平与炎性因子、免疫功能及哮喘控制程度存在一定相关性，与肺功能无相关性，具有一定的临床指导价值。

利益冲突：所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明

吴新竹：设计试验、实施研究、采集数据、分析/解释数据、撰写文章;查琳：文章审核、统计分析;马旺生、李慧：行政/技术或材料支持、指导