薄晓莉 哈丽亚·哈力木别克 潘 静 张清华 付晓雯 王建军

宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，其发生率和病死率常年居高不下[1，2]。尽管早期宫颈癌的筛查和治疗有助于挽救60%～90%患者的生命，但多数患者仍在晚期发现，导致其预后较差[3]。因此，阐明宫颈癌发生、发展的分子机制，有助于制定更好的治疗策略。

微小RNA(microRNAs, miRNAs)是一类存在于生物体的非编码RNA分子，其长度约21～25个核苷酸[4]。miRNAs通过结合mRNAs的3′端非翻译区，调节蛋白表达，进而在多种生理和病理过程中发挥作用[5]。近期的一项研究显示，miR-222在宫颈癌中显著高表达[6]。miR-222是一种前体微小RNA，其成熟体miR-222-3p是在miR-222的3′端臂加工而来。然而，miR-222-3p在宫颈癌中的作用尚未见报道。本研究旨在明确miR-222-3p在宫颈癌细胞恶性生物学行为中的具体作用。

材料与方法

1.研究对象：5例宫颈癌患者来自于笔者医院妇产科，5例健康人来自笔者医院体检中心，其年龄、体重等指标均相匹配。受试对象均被告知本研究的目的，并签署知情同意书。涉及的操作遵照笔者医院医学伦理学委员会的相关规定。

2.细胞系：正常宫颈上皮永生化细胞系End1/E6E7、宫颈癌细胞系SiHa、人胚肾细胞HEK-293T均购自美国ATCC公司，保存于实验室。

3.试剂与仪器：胎牛血清FBS、DMEM培养基和高糖DMEM培养基(美国Gibco公司)，miRNeasy Serum/Plasma试剂盒和miRNeasy Mini试剂盒(德国Qiagen公司)，SYBR Premix Ex Taq Ⅱ试剂盒(日本TaKaRa公司)，引物、miR-222-3p mimics、SOCS5过表达质粒、载有野生型SOCS5和突变型SOCS5的载体pGL3(中国生工公司)，Lipofectamine 3000(美国Invitrogen公司)，CCK-8试剂盒、RIPA裂解液、BCA蛋白浓度测定试剂盒、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒、小鼠抗GAPDH单克隆抗体和辣根过氧化物酶耦……