徐少华，巢梓寒，张健，胡江兰，黄威，刘一舟

（长沙医学院，湖南 长沙）

1 国内外研究现状与水平

酒精中毒是长期过量饮酒引起的中枢神经系统功能障碍，表现为患病个体对酒的强烈渴求，并且在停止饮酒后出现如出汗、震颤、呕吐与坐立难安等症状。现有研究表明，慢性酒精中毒会增加罹患心脑血管疾病的风险，造成脑部神经元的损伤且导致个体学习记忆能力的减退[1]。酒精进入人体后，经过消化道直接通过生物膜进入血液循环，进而代谢。肝脏代谢百分之九十以上的乙醇，剩余的或以原形排出体外，或在肾脏和肌肉中代谢。乙醇及其代谢产物都可损伤肝脏，造成肝脏的一系列疾病。酗酒还是诱发或加重高血压、肝病的因素。饮酒消费群体日益大，酒精中毒尤其是急性酒精中毒的人数剧增，严重损害患者身体健康，同时又会引发一系列社会问题，该病是急诊门诊常见病、多发病。因此，如何有效解决酒精中毒，开发有效的防醉酒及醒酒药物，是当今医疗行业及医疗工作者的关注要点之一。但目前解酒药的研究深度还不够，大多数研究都在于解酒作用的描述，而对其解酒机理的研究还不多，因此还有很大的发挥空间；乙醇在体内代谢途径多，酶系复杂，且不同人种、不同性别对乙醇的敏感程度是不同的，因此解酒药的研究还存在一定的难度。

纳洛酮是目前临床上最常用的一种重症急性酒精中毒的治疗药物，主要是由于纳洛酮具有非常显著的促清醒作用。但长期的临床实践发现，虽然纳洛酮具有良好的促清醒作用，但是部分患者在应用纳洛酮之后，会遗留有较为严重的消化道或神经系统症状，严重时甚至会导致患者出现上消化道出血、肝肾功能受损等问题。因此，单纯应用纳洛酮并不是一种十分理想的重症急性酒精中毒解毒方式[2]。

近年来随着对中医药逐步的深入研究，逐渐认识到中医药在防治酒精中毒方面有一定的特色和优势，中医药在解酒作用日益受到关注[3]。我国中草药资源丰富，现今以中草药为制剂的解酒保健品大受欢迎，中草药制剂以其毒副作用小、依从性好等特点，广泛地受到人们的青睐。因此，研究中草药的解酒功效具有显著的应用价值，随着天然药物化学的不断发展，许多中草药中的化学成分已相对明确，若将其有效成分制成方便于临床的新剂型，必将会有广阔的应用前景[4]。

2 白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根的解酒疗效

白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根这四味中草药是无毒的且依从性好的，相关文献记载了此四味药有一定的解酒疗效。

中药白扁豆性平味甘，药食两用，是可以健脾和中而化湿的药物，也可以解酒毒。在《雷公炮制药性解》中指出其“味甘，性微温无毒，入脾经。主补脾益气，和中止泻，醋制能疗霍乱转筋，解酒毒及河毒，一切草木毒。叶主蛇虫咬伤，花主赤白带下。”《名医别录》记载扁豆“和中下气”可升清降浊，因而有调肝和胃的功效。主治脾虚呕逆，食少久泄，赤白带下，酒醉呕吐等病症[5]。

中药枳椇子,鼠李目鼠李科枳椇属植物，又名拐枣，分布广泛，性平而味甘酸，是解酒毒的药物之一。孙思邈的《千金翼方》记载“枳椇……以为木屋，屋中的酒则味薄”。《证治准绳》记载“解酒毒无如枝矩子之妙，一名枳椇……赵以德以治酒人发热，用枝矩子而愈，即此也”。

中药葛花为葛的干燥花，作为一种名贵的中药材，味辛甘，产地广泛，可用来解酒毒。酒精中毒患者的治疗中应用已久，且效果良好,但是该方的解酒醒脑作用不足,尤其对于重症急性酒精中毒患者来说,葛花解酲汤在其嗜睡、昏迷、醒后长时间恶心、纳差、头昏、乏力等方面的疗效欠佳。因此,此次研究中,加入了枳椇子等中药组成加味葛花解醒汤来增强其药效，提升其在重症急性酒精中毒患者中的治疗效果。并联合常规药物纳洛酮进行治疗,取得了十分显著的疗效[6]。《东医宝鉴》记载:“醒酒不醉，宜万杯不醉丹、神仙不醉丹、醉乡宝屑、益牌丸、龙脑汤、葛花散、三豆解醒汤。”

中药白茅根为禾本科植物白茅的干燥根茎，性平味甘。现代通过对白茅根化学药理与临床应用的探讨表明白茅根煎剂联合聚乙二醇干扰素、利巴韦林治疗慢性丙型肝炎在提高SVR 率、护肝降酶、减轻不良反应方面较单纯应用聚乙二醇干扰素和利巴韦林治疗具有更好的疗效。白茅根具有抗HBV 病毒能力,对提高乙型肝炎表面抗原阳性转阴率有显著效果,可改善患者的自觉症状。白茅根配伍解酒清肝汤治疗酒精性肝病46 例,有效率高达95.65%;以白茅根配伍的消脂解酒方治疗酒精性脂肪肝58 例,有效率为86.2%[7]。《本草纲目》记载：止吐衄诸血，伤寒哕逆，肺热喘急，水肿黄胆，解酒毒。

有研究及文献表明了枳椇子、葛花、白扁豆、白茅根这四味具有代表性的中药具有解酒作用，但是此四味药在解酒作用的对比和量化指标暂时还没有相关研究。

随着科学技术的进步，现在多利用现代仪器对中医解酒的方与药进行分析、提纯，深入到了分子、化学水平来研究中药中的某些成分对醒酒的作用，也取得了一些效果，但是中药讲究配伍，突出强调四气五味七情，在中草炮制、水煎的过程中发生的复杂物理与化学变化，仅用现代的仪器是无法详尽剖析的，因此未能充分挖掘出中医药的潜能。如何在中医基础理论的指导下，在中药学的基础上，充分发挥中药配伍间的相互作用，用最少的药使中药的配伍力量达到最强、最有效，这方面应该作为治疗醒酒的一个突破口和研究方向。探索多形式、多途径的中医诊疗手段、中医药组合方案来发挥中医药的优势具有重大意义。目前临床上应用中医综合方案来治疗急性酒精中毒用之甚少且组方不够严谨，治法不够统一。中医治疗急性酒精中毒，除单味中药、中药复方制剂外，穴位按摩、针灸等也有很大探索空间，急需规范急性酒精中毒中医诊疗方案，从而广泛应用于临床[8]。

3 酒精标准曲线的制定

实验目的是用分光光度法制定酒精浓度标准曲线，实验原理：在硫酸介质中，乙醇可定量被重铬酸钾氧化，生成绿色三价铬：3C2H5OH+2K2Cr2O7+H2SO4==3CH3COOH+3Cr2(SO4)3+2K2SO4+11H2O，实验利用重铬酸钾定量氧化乙醇，重铬酸钾褪色后吸光度改变，其吸光度的变化和与乙醇浓度呈现线性关系，进而演算出线性方程，以便于利用线性方程通过吸光度计算出乙醇浓度。

3.1 实验材料

3.1.1 实验仪器

恒温水浴锅，分光光度计；电子天平，容量瓶：100mL；移液管：10mL（2 支），5mL、1mL（各1 支）；10mL 比色管若干；150mL 烧杯若干；100mL 量筒；洗瓶；玻璃棒；洗耳球等。

3.1.2 实验试剂

浓H2SO4，无水乙醇，重铬酸钾，蒸馏水等，所用试剂均为分析纯。5%重铬酸钾溶液：称取5g 的重铬酸钾于烧杯中加50mL蒸馏水溶解，边搅拌边加入10mL 浓硫酸，放冷，然后再加入蒸馏水至100mL。1%乙醇标准溶液：取1mL 无水乙醇于100mL 容量瓶中，加水至刻度。此溶液即为1%的酒精原液。

3.2 实验步骤

取9 支刻度一致的10mL 比色管，按下表数据配制不同浓度的乙醇溶液。

表1 不同浓度乙醇浓度配制

每支比色管中加入重铬酸钾溶液2.0mL，加水至刻度。100℃水浴中加热10min，流水冷却10min。在620nm 下，以1 号管作参比，测定各组的吸光度。

3.3 实验结果

图1 曲线方程为：y = 0.6502x，R2 = 0.998

3.4 讨论

r2= 0.998，故r 极限接近1，表明x 与y 之间呈直线关系的密切程度极高，可认为该曲线方程为线性方程。所以可证明其吸光度的变化和与乙醇浓度呈现线性关系，此为酒精浓度标准曲线。

4 小鼠最佳致醉量的探究

4.1 引言

酒精在体内的代谢过程，主要在肝脏中进行，少量酒精摄入体内之后，会马上随肺部呼吸或经汗腺排出体外，绝大部分酒精在肝脏中先与乙醇脱氢酶作用，生成乙醛，乙醛有害，但它很快会在乙醛脱氢酶的作用下转化成乙酸。酒精在人体内的代谢速率是有限度的，如果饮酒过量，酒精就会在体内器官，特别是在肝脏和大脑中积蓄，积蓄至一定程度即出现酒精中毒症状。本实验采用小白鼠灌胃52 度白酒造模成急性酒精中毒，通过观察小鼠翻正反射，获取小鼠致醉量、致死量的数据，通过数据对比得出小鼠最佳致醉量。

4.2 实验材料

4.2.1 实验动物

27 只健康小白鼠（由长沙医学院实验动物中心提供），雌雄并用，体重（23±2）g。

4.2.2 实验试剂

红星二锅头白酒52 度，北京红星股份有限公司，批号：20190916。

4.2.3 实验器材

小鼠灌胃器、小烧杯、电子秤。

4.3 实验步骤

（1）取小白鼠27 只，将小白鼠禁食不禁水12 小时；（2）实验开始前将小白鼠平均分成低、中、高三组，每组9 只，做好称重记录，并标明序号；（3）以小白鼠的体重为依据灌胃不同剂量的红星二锅头白酒：第一组小白鼠灌胃0.14ML/10g 的白酒灌胃量、第二组小白鼠灌胃0.16ML/10g 的白酒灌胃量、第三组小白鼠灌胃0.18ML/10g 的白酒灌胃量；（4）从给小白鼠灌胃白酒后开始计时，观察记录小白鼠的一般情况，判断何时翻正反射消失，记录好时间。观察有无死亡现象；（5）从小鼠翻正反射消失后开始计时，观察记录小白鼠的一般情况，判断何时翻正反射出现，记录好时间。观察有无死亡现象；（6）记录灌胃的时间后，在之后的24h 之内，定时观察小白鼠有无死亡现象。

4.4 实验指标

4.4.1 小鼠翻正反射

正常小鼠轻轻用手将其侧卧或仰卧会立即恢复正常姿势即翻正反射。翻正反射消失是小鼠产生睡眠作用的客观指标，具体操作过程：用手将小鼠轻轻侧卧或仰卧超过1 分钟以上即为翻正反射消失。本实验小鼠翻正反射消失则为醉酒。

4.4.2 醉酒耐受时间

从小白鼠灌胃白酒的时间到小白鼠翻正反射消失的时间。

4.4.3 醒酒时间

从小白鼠翻正反射消失的时间到小白鼠翻正反射出现的时间。

4.5 实验结果

灌胃前小白鼠发育良好，毛发有色泽、神志清晰，步态稳健，口鼻爪尾温湿度适中，无皮下出血，二便正常。

灌胃0.14ML/10g 后，小白鼠在灌胃后的1～2 分钟之内行动活跃，2 分钟后相继开始行动迟缓伴随干呕，平衡能力差而步态不稳，安静懒动，闭眼浅睡。2 只小白鼠不可翻转，其余小白鼠相继出现翻正反射消失的现象。24h 无小白鼠出现死亡现象。

灌胃0.16ML/10g 后，小白鼠在灌胃后的1～2 分钟之内行动活跃，2 分钟后相继开始行动迟缓伴随干呕，呆滞，平衡能力差而步态不稳，后下肢拖地，安静懒动，昏睡。全部小白鼠相继出现翻正反射消失的现象。24h 无小白鼠出现死亡现象。

灌胃0.20ML/10g 后，小白鼠在灌胃后的1～2 分钟之内行动活跃，2 分钟后相继开始行动迟缓伴随干呕，呆滞，平衡能力差而步态不稳，口角有泡沫状液体，昏睡。1 只小白鼠灌胃后5min 之内死亡，其余小白鼠相继出现翻正反射消失的现象。24h 之内有3只小白鼠死亡。

4.5.1 三个小组小白鼠灌胃相应剂量后的平均醉酒耐受时间，如图2。

图2 各组小鼠平均醉酒耐受时间

从图2 见，随着灌胃剂量的增加，小白鼠平均醉酒耐受时间缩短。

4.5.2 三个小组小白鼠灌胃相应剂量后的平均醒酒时间，如图3。

图3 各组小鼠平均醒酒时间

从图3 见，随着灌胃剂量的增加，小白鼠平均醒酒时间延长。4.5.3 三个小组小白鼠灌胃相应剂量后的致醉率和24h 生存率，如图4。

图4 各组小鼠致醉率和24h 生存率的对比

从图4 见，灌胃0.16mL/10g 的小白鼠的致醉率和24h 生存率为100%。

4.6 讨论

0.14 mL/10g 的灌胃剂量不适合作为最佳致醉量，虽然24h 生存率为100%，但是致醉率仅有77%。

0.20 mL/10g 的灌胃剂量下，小鼠在20min 内醉酒，但是醒酒时间过长，不利于实验的进行。而且24h 生存率只有66%，因此不适合作为最佳致醉量，可以作为致死量的模糊界限。

0.16 mL/10g 的灌胃剂量下小鼠的致醉率和24h 生存率都达到100%，醉酒耐受时间和醒酒时间都相对较短，便于进行实验。因0.16mL/10g 的灌胃剂量可以作为最佳致醉量。

5 白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根解酒作用的对比研究

酒精中毒俗称醉酒，是指患者一次饮大量酒精（乙醇）后发生的机体机能异常状态，对神经系统和肝脏伤害最严重。医学上将其分为急性中毒和慢性中毒两种，前者可在短时间内给患者带来较大伤害，甚至可以直接或间接导致死亡。饮酒后的酒精约20%在胃内吸收，80%在十二指肠及小肠吸收。酒精的中毒量和致死量因人而异。本实验采用小白鼠灌胃52 度白酒造模成急性酒精中毒，先分别灌胃白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根浓缩生药，观察一段时间后灌胃酒，观察小鼠的基本情况，再取血测取吸光度，记录各自血样的吸光度以验证并比较研究白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根这四味药解酒作用的强弱对比。

5.1 实验材料

5.1.1 实验动物

75 只健康小白鼠（由长沙医学院实验动物中心提供），雌雄并用，体重（23±2）g。

5.1.2 实验试剂

红星二锅头白酒52 度（北京红星股份有限公司，批号：20190916），无水乙醇（无锡市亚泰联合化工有限公司，批号2019-08-01），重铬酸钾（由长沙医学院药学院提供），葛花（安国市嘉德食品有限公司，批号：2019/08/23），枳椇子（沐阳小观园商贸有限公司，批号：2019/08/26），白扁豆（购于怡轩大药房，长沙医学院附属第一医院旁，白茅根（购于怡轩大药房，长沙医学院附属第一医院旁）

5.1.3 实验器材

小鼠灌胃器、小烧杯、大烧杯，高速离心机，分光光度计，试管，玻璃棒，1mL 注射器，采血管若干。

5.2 实验步骤

(1) 将小鼠为五组（A、B、C、D、E 组），A 组：白扁豆和红星二锅头（高、中、低三个剂量）；B 组：枳椇子和红星二锅头（高、中、低三个剂量）；C 组：葛花和红星二锅头（高、中、低三个剂量）；D 组：白茅根和红星二锅头（高、中、低三个剂量）；E 组：等量的蒸馏水和红星二锅头（高、中、低三个剂量），A、B、C、D、E 组分别取15 只小鼠随机分成3 组：高、中、低剂量组，共15 个组，备好标签于各组。

(2) 按组称重，记录好小鼠质量。

(3) 计算每小组小鼠平均的饮酒（二锅头）的量和给药量

由小鼠最佳致醉量的探究实验中得出最佳致醉量为0.16mL/10g，致死量为0.12mL/10g。故高、中、低剂量组中，红星二锅头剂量可以分别为小白鼠最佳致醉量的100%、110%和120%，即0.16mL/10g、0.176mL/10g 和0.192mL/10g。

据文献[9]得知动物给药剂量小鼠公斤体重剂量=人公斤体重剂量×9.01[13]。

(4) 灌胃给药 按照空白、葛花、枳椇子、白扁豆和白茅根的顺序，先将一大组全部给药，再开始第二大组的实验。

(5) 灌胃给酒 按照空白、葛花、枳椇子、白扁豆和白茅根的顺序，先将一大组全部给药，再开始第二大组的实验。

(6) 观察记录小白鼠的一般情况。

(7) 1h 之后取眼球血。

(8) 处理血清样品：取所得血液于采血管中，于高速离心机离心5min，取血清0.2mL，加5%硫酸溶液混匀，再加5%钨酸钠0.2mL，混匀，于高速离心机离心5min，取上清液。

(9) 测量吸光度：取所得血清0.2mL，加5%钨酸钠0.1mL，0.5mol/l 硫酸0.1mL，于高速离心机离心5min，吸取上清液0.3mL，加入5%重铬酸钾溶液0.6mL，沸水浴3min 后加入蒸馏水0.6mL，冷却至室温。于620nm 测量吸光度。

(10) 酒精浓度标准曲线绘制结果。

5.3 实验结果

5.3.1 高剂量组血中乙醇含量与用药后显著性差异比较。

表1 高剂量组血中乙醇含量与用药后显著性差异比较

高剂量组中白扁豆、枳椇子和葛花浓缩生药用药后乙醇降低值有显著性意义，白茅根浓缩生药用药后乙醇降低值没有显著性意义。根据血中乙醇平均浓度的对比得知在高剂量组中，解酒能力顺序（由高到低）：葛花、枳椇子、白扁豆。

5.3.2 中剂量组血中乙醇含量与用药后显著性差异比较。

表 2 中剂量组血中乙醇含量与用药后显著性差异比较

中剂量组中白扁豆、葛花和白茅根浓缩生药用药后乙醇降低值有显著性意义，枳椇子浓缩生药用药后乙醇降低值没有显著性意义。根据血中乙醇平均浓度的对比得知在高剂量组中，解酒能力顺序（由高到低）:葛花、白茅根、白扁豆。

5.3.3 低剂量组血中乙醇含量与用药后显著性差异比较。

表 3 低剂量组血中乙醇含量与用药后显著性差异比较

低剂量组中白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根浓缩生药用药后乙醇降低值有显著性意义。根据血中乙醇平均浓度的对比得知在低剂量组中，解酒能力顺序（由高到低）:葛花、白茅根、枳椇子、白扁豆。

6 讨论

根据测取各剂量组灌胃不同药物的吸光度值，并进行用药前后的显著性差异检验与平均值比较，得出以下结果。

高剂量组中白扁豆、枳椇子和葛花浓缩生药用药后乙醇降低值有显著性意义，白茅根浓缩生药用药后乙醇降低值没有显著性意义。解酒能力顺序（降序）：葛花、枳椇子、白扁豆；中剂量组中白扁豆、葛花和白茅根浓缩生药用药后乙醇降低值有显著性意义，枳椇子浓缩生药用药后乙醇降低值没有显著性意义。解酒能力顺序（降序）:葛花、白茅根、白扁豆；低剂量组中白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根浓缩生药用药后乙醇降低值均有显著性意义。解酒能力顺序（降序）:葛花、白茅根、枳椇子、白扁豆。可初步认为白扁豆为解酒作用综合性最强的中草药。

7 结语和展望

本论文选择白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根这四味具有代表性的解酒药，通过采用小白鼠灌胃52 度白酒造模成急性酒精中毒，比较白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根浓缩生药对于不同程度急性酒精中毒小白鼠血清乙醇浓度的影响，重在研究白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根这四味药解酒作用的强弱对比，从中选择解酒作用综合性最强的中草药。实验结果显示：高剂量组中仅白茅根浓缩生药用药后小鼠血清乙醇降低值没有显著性意义。解酒能力顺序（降序）：葛花、枳椇子、白扁豆；中剂量组中仅枳椇子浓缩生药用药后乙醇降低值没有显著性意义。解酒能力顺序（降序）:葛花、白茅根、白扁豆；低剂量组中四种药物浓缩生药用药后乙醇降低值均有显著性意义。解酒能力顺序（降序）:葛花、白茅根、枳椇子、白扁豆。得出结论：葛花初步认为是解酒作用综合性最强的中草药。

本研究初步探讨了白扁豆、枳椇子、葛花和白茅根这四味具有代表性的解酒药的解酒作用的强弱对比，造模演绎了小鼠服用上四味药物后在灌胃高中低三种不同剂量52 度白酒下血清乙醇的变化情况。但是，本研究只是处于基础研究的初级研究阶段，仍可通过相关的对于造模小鼠肝组织 ADH 活性的研究对于解酒保肝有些深层次的发现乃至临床实验，另外可以对于葛花开发为解酒药品的制作工艺有进一步的研究。