严关所，张辉，张顺新，吕念词，张以芳

(1.泸西县白水镇农业综合服务中心，云南 泸西 652404；2.云南农业大学动物医学院，云南 昆明 650201)

伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)归属于疱疹病毒科，它的病毒粒子形状呈球形或椭圆形[1]。伪狂犬病毒的血清型只有一种，但是当毒株不一样时，它的毒力和生物学特征也相对应的不同[2]。伪狂犬病毒的增殖不复杂，在很多种组织细胞内都能够培养出来，其中对其最敏感的细胞是兔肾和猪肾两种细胞，细胞的病变很明显[3]。伪狂犬病毒感染猪，临床可直接观察到肾脏上会出现针尖大小出血点，当有神经症状出现时，脑膜会看到出血、充血症状，大脑中脊髓液会变多；肝、脾、扁桃体上有坏死点出现，发生肺水肿；胃黏膜出血，出现炎症[4]。

伪狂犬病毒的传染源可能是被感染或者带病毒的猪和带病毒的老鼠，被感染的猪、带有病毒的猪及带有病毒的老鼠都能够通过体液将病毒排到体外，通过呼吸和接触都会被传染[5]。伪狂犬病毒能够通过母猪直接传染给下一代，被感染之后往往形成死胎和木乃伊胎[6]。被病毒感染之后，母猪会发生流产，对胎儿的影响较大，对母猪的繁育能力产生终身影响[6]。公猪被感染后，对其性欲产生极大影响，功能下降，从而失去配种的价值[7]。

目前，大多猪场通过免疫猪伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗来防制猪伪狂犬病毒传染，使用PRV-gE ELISA或PRV-gB ELISA试剂检测猪体内的抗体，能够区分猪产生的抗体是来自于野毒感染(PRV-gE抗体)还是疫苗免疫(PRV-gB抗体)，以此来实现猪场对伪狂犬病毒的净化目的，减少对养殖行业造成的损失[8]。

本文采用PRV-gE ELISA试剂盒，对4个猪场的PRV-gE野毒感染抗体进行调查，可为猪伪狂犬病流行病学及防制提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品来源

2019年4月采自4个猪场的血清样品217份，其中母猪153份、仔猪10份、育肥猪8份、公猪36份、保育猪10份。包括猪场一：公猪血清样品22份；猪场二：母猪血清样品54份；猪场三：公猪及母猪血清样品30份；猪场四：公猪、母猪、仔猪、保育猪及育肥猪血清样品111份。除猪场一的公猪外，其余均免疫过猪伪狂犬病毒gE基因缺失苗。

1.2 试验材料

PRV-gE ELISA诊断试剂盒(美国 IDEXX 生物技术公司)、移液器、双蒸水、烘箱、加样槽。

1.3 方法步骤

试剂盒使用时所有试剂应恢复至18～26℃，使用前试剂应摇均，操作步骤参照PRV-gE ELISA诊断试剂盒使用说明书进行，实验结束计算S/N值。计算公式：S/N=〔样品吸光值(650)/阴性对照平均值〕。

1.4 结果判定

当S/N≤0.60时，PRV-gE抗体阳性；当0.600.70时，PRV-gE抗体阴性。

2 结果与分析

4个猪场PRV gE抗体检测结果见表1。

猪场一：检测公猪血液样品22份，检出阳性13份，阳性率为59.09%，S/N平均值为0.8681。

猪场二：检测母猪血液样品54份，检出阳性11份，阳性率为20.37%，S/N平均值为0.8681。

猪场三：检测公猪4头，检出阳性0头，未检出阳性公猪，S/N平均值为0.9379；检测母猪26头，检出阳性1头，阳性率3.85%，S/N平均值为0.9037。

猪场四：检测样品111份，其中检测公猪10头检出阳性1头，阳性率为10%，S/N平均值为0.8037；母猪73头检出阳性24头，阳性率32.88%，S/N平均值为0.9079，仔猪10头检出阳性3头，阳性率30%，S/N平均值为0.9066；保育猪10头，检出阳性3头，阳性率30%，S/N平均值为0.7141；育肥猪8头未检出阳性，S/N平均值为1.0194。

表1 4个猪场PRV-gE抗体ELISA检测结果

3 讨论

从样品来源看，只有猪场四采样比较全面，采集了种猪、仔猪、保育猪及育肥猪样品，而其他3个场只采集了种公猪、母猪样品。

猪场三情况较好，检测公猪未感染，母猪有1头感染，可以把感染母猪尽快隔离净化处理，以防感染进一步扩大传染。猪场一检测公猪有59.09%感染，这个猪场的种公猪应及时清群，精液已不能使用。猪场四检出1头公猪阳性，这头公猪已不可用，应及时淘汰，母猪、仔猪及保育猪的感染率也达到了30%比例，应在加强防制的基础上，有计划的净化阳性猪，提高猪场生产效率。

4个猪场的种公猪或母猪均检出了阳性，说明云南省中小型猪场应特别加强种猪的管理，种猪的引种应引起高度重视，避免从阳性猪场进行引种，引种时必须对引进的种猪进行采样检测。另外，注射过疫苗的猪场也应同时监测疫苗免疫(PRV-gB)抗体，了解疫苗免疫效果及抗体变化，制定合理的免疫程序。

以上4个猪场gE抗体总阳性率为25.81%，比苏琳琳[2]等报道2016年检出阳性率13.2%、2017检测阳性率13.8%，郑辉[9]等报道2015年我国部分地区猪伪狂犬病血清学调查检出16.48%的阳性率高。说明云南省部分猪场gE感染有增高趋势，应引起云南省养猪行业相关人员重视。