谢 佳，曾春兰，王 俊，赵 攀 (重庆两江新区第一人民医院普外科，重庆401121)

乳腺癌是一种在女性中常见的恶性肿瘤，随着社会的快速发展，乳腺癌的发病率逐渐升高，且发病人群逐渐趋于年轻化，严重影响女性人群的生活质量[1-3]。FOXM1属于FOX基因家族中的一员，参与多种恶性肿瘤的发生，在肿瘤患者中呈高表达状态[4]。有研究表明，FOXM1在乳腺癌、胃癌、前列腺癌等恶性肿瘤中的表达均高于正常人[4]。临床上乳腺癌常采用化学治疗，其中赫赛汀为常用一线药物，但目前对于赫赛汀具体的使用剂量无明确的定论，不同研究使用的剂量也有所不同[5-7]。本研究通过调控FOXM1基因，探究其对乳腺癌BT474细胞赫赛汀药物敏感性的影响，以期为乳腺癌的治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

乳腺癌BT474细胞购自上海泽业生物科技有限公司。主要试剂：赫赛汀，购自Genentech 罗氏子公司基因泰克(国药准字J20110020)；兔抗大鼠FOXM1抗体购自Proteintech中国公司，小鼠抗大鼠PI3K、p-PI3K抗体、兔抗人AKT、p-AKT抗体均购自上海陶素生化科技有限公司，MTT试剂盒、Transwell试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司；PBS缓冲液购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 将冻存的乳腺癌BT474细胞取出后，快速采用40 ℃的温度火浴，迅速摇晃均匀至融化，加入2 mL的完全培养基(10%PBS，10%～15%的56 mL胎牛血清，1%的5.56 mL青链霉素，500 mL RPMI1640培养基)，1 000 r/min，离心5 min，弃上清液，使用完全培养基重悬，传代至培养瓶中，培养体系为5 mL，置于CO2培养箱中培养(饱和湿度95%、温度37 ℃、CO2浓度5%)，第2天换液，当培养瓶中细胞融合率达到80%～90%时进行传代。……