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黄芪甲苷通过调控Keap1-Nrf2-ARE信号通路减轻PM2.5诱导的肾小管上皮细胞氧化损伤

2020-04-21赵颖丹张天嵩张伟伟王汉清

安徽中医药大学学报 2020年2期
关键词:氧化应激剂量检测

赵颖丹,张天嵩,马 骏,张伟伟,易 扬,顾 波,王汉清,宣 怡

(上海市静安区中心医院 复旦大学附属华山医院静安分院肾内科,上海 200040)

在大气颗粒物中,细颗粒物2.5(particulate matter 2.5,PM2.5)占有较大比例,由于PM2.5具有较大的比表面积,其更易吸附重金属和有机物,进而损伤人体健康[1-2],因而具有更高的毒性。最近的研究表明,PM2.5很容易通过肺泡上皮细胞进入循环系统,最终破坏心血管系统和肾脏[3-5]。如Zhang等[6]研究发现,短期暴露PM2.5加重氧化应激和炎症反应,从而促进BALB/c小鼠肾脏损伤。Yang等[7]同样发现,PM2.5能够激活核因子红细胞相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)/血红素氧化酶-1(heme oxygenase 1, HO1)通路,进而加重人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤。因此,抑制氧化应激将有助于减轻PM2.5导致的肾损伤。黄芪甲苷是从常见中药黄芪中提取的活性成分。Gui等[8]学者报道,黄芪甲苷可通过抑制凋亡途径和氧化应激通路预防缺血引起的急性肾损伤。由此推测,黄芪甲苷可能有助于减轻PM2.5诱导的肾脏氧化损伤。因此,本研究通过体外实验探究黄芪甲苷在抑制PM2.5诱导的肾脏氧化损伤中的作用及其分子机制,以期为PM2.5所致肾脏氧化损伤的治疗提供帮助。

1 材料

1.1 试剂 HK-2细胞购:中国科学院细胞库;DMEM和F12培养液:美国Thermo Fisher Scientific公司;黄芪甲苷:南京春秋生物工程有限公司;Western blot相关试剂、Annexin Ⅴ-FITC细胞凋亡检测试剂盒、CCK8试剂盒、BeyoClickTMEdU-488细胞增殖检测试剂盒和一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒:上海碧云天生物技术有限公司;RIPA裂解液:上海雅吉生物科技有限公司;总活性氧(reactive oxygen species,ROS)分析试剂盒:Sigma Aldrich;抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-px)检测试剂盒:R&D Systems;……

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