曲梅 田祎 黄瑛 刘白薇 张新 吕冰 贾蕾 王全意

副溶血性弧菌(vibrio parahaemolyticus, VP)是沿海地区引起食物中毒和夏秋季腹泻的首要病原菌。副溶血弧菌血清型复杂多样。 目前,已知13 个O 抗原和79 个K 抗原[1],有71 种血清型可引起急性胃肠炎。 北京市虽为内陆城市,但近年来,由于饮食习惯和物流的发展,副溶血性血弧菌引起的腹泻也呈上升趋势。 由于抗生素的不规范使用和选择压力,细菌耐药问题也日益严重,许多副溶血性弧菌临床分离菌株出现多重耐药现象[2,3]。 北京市自2010 年以来,在全市二级以上医院肠道门诊开展腹泻病原学监测,为了解北京市副溶血性弧菌血清型变迁和流行特征,现将该市2010-2019 年副溶血性弧菌临床分离株进行血清型和耐药性分析。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 2010 年4 月-2019 年12 月,以北京市16 个辖区为监测点,每区每周采集10 份感染性腹泻病人新鲜粪便样本,全年每区最低监测量330 份,截止到2019 年12 月份,全市共收集46 249 份样本。所有样本进行副溶血性弧菌的分离、培养和鉴定。

1.2 方法

1.2.1 分离培养和生化鉴定: 分离培养参照《感染性腹泻诊断标准》(WS271-2007 )附录B.3 进行。 样本接种于10 mL 含3% NaCl 的碱性胨水中,37 ℃增菌培养6 h。 增菌液划线接种于科玛嘉弧菌显色琼脂平板,置37 ℃培养18 ～24 h。 挑取可疑菌落,采用VITEK2-Compact 全自动微生物鉴定系统(法国梅里埃公司)进行系统生化鉴定。

1.2.2 血清分型: 采用诊断血清(日本生研公司)进行分型。 取一定量细菌于3%NaCl 盐水中,121 ℃,处理30 min,离心10 min(4 000 r/min),弃上清。 取菌体,做O 抗原血清凝集试验。 K 抗原鉴定:直接取浓菌悬液与多价抗K 血清按适当比例混合,出现凝集反应时再用单个抗血清进行检测。……