孙 毅 戴宗浩 彭梦华 叶俊华 徐 黎 刘占斌

(1.江西农业大学，南昌 330045)(2.公安部南昌警犬基地，南昌 330100)

钩端螺旋体(Leptospiraspp.简称钩体)是一种极难培养且生长缓慢的需氧型革兰阴性螺旋体原虫[1],种类很多，可分为致病性和非致病性钩端螺旋体两大类。致病性钩端螺旋体能导致人和动物患钩端螺旋体病(Leptospirosis，简称钩体病)。钩体病是在世界各地都广泛流行的一种人畜共患病，中国绝大多数地区都有不同程度的流行，对人畜健康造成很大危害，是中国重点防治的传染病之一。鼠和啮齿动物是其主要传染源，家畜，特别是猪，犬，牛等是钩体非常重要的储存宿主和传染源[2]。动物中, 犬钩端螺旋体的感染率较高，大多呈隐性感染，钩体在肾脏中长期存在，通过尿液持续向外排菌[3]。钩体病在工作犬群中时有发生，影响工作犬的繁殖、训练与使用，经调查，该病的发生与该地带菌鼠关系密切，因此我们在江西某些养犬场通过捕捉褐家鼠(Rattusnorvegicus)来进行钩端螺旋体的分离培养，菌株的纯化，并进行PCR检测以探明感染源。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1动物来源：钩端螺旋体的储存宿主动物褐家鼠是通过捕鼠笼在江西某些犬场大量捕捉，共捕获约20只；金黄地鼠16只，雌雄各8只，4周龄，体质量在30～40 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证： SCXK(京)2016-0006)。

1.1.2主要仪器：GenAmp PCR仪购自Applied Biosystems公司；DYY-Ⅲ-12B电泳仪购自北京六一仪器厂；凝胶成像系统购自上海培清科技有限公司；CO2恒温培养箱购自Thermo Fisher公司。

1.1.3主要试剂：核酸提取试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司；……