陈毅华, 程芳, 何选秋, 周元平, 彭雁忠, 李雅琴, 戴璐, 齐明华△

1北京大学深圳医院感染性疾病科(广东深圳 518035)； 2南方医科大学南方医院感染性疾病科(广东广州 510515)

高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1, HMGB1)作为一种损伤相关模式蛋白，于1973年被发现，属高迁移率族成员。高迁移率蛋白家族还包括高迁移率族蛋白B2(high mobility group box 2, HMGB2)和高迁移率族蛋白B3(high mobility group box 3, HMGB3)，其特点为分子量低，在凝胶电泳中迁移率高。肾素-血管紧张素系统(renin angiotensin system，RAS)在维持内环境的稳定性，调节人体的血压、水分、电解质等中起着非常重要的作用，是人体中一个关键的神经-体液调节系统。RAS主要包括血管紧张素原酶、血管紧张素原、血管紧张素Ⅰ(AngiotensinⅠ，AngⅠ)、血管紧张素转换酶、血管紧张素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ，AngⅡ)和血管紧张素受体。目前研究表明，AngⅡ和HMGB1都能在促进肿瘤细胞的迁移、侵袭作用上促进肝癌的发生发展和远处转移，但AngⅡ与HMGB1的作用关系目前尚不明确。因此，我们于2017年6月至2018年6月通过调控HMGB1的表达，观察AngⅡ诱导HepG2发生上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的变化。

1 材料与方法

1.1 细胞培养及药物处理 本研究所用肝癌细胞HepG2由北京大学深圳医院中心实验室保存。HepG2细胞的培养方法参照以前的研究[1]，用DMEM 在37℃和5% CO2的培养箱中培养，[Gibco DMEM培养基(货号：C11875500BT)加入10%热灭活Gibco 胎牛血清(货号：10099-141)，100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素]。台盼蓝染色法评估细胞活性。

用胰酶消化细胞，接种至培养瓶中，每瓶约106个细胞，利用DMEM完全培养基稀释AngⅡ至终浓度为10-7nmol/L。分为表达组、SiRNA静默组和对照组，表达组和SiRNA静默组加入含有AngⅡ的培养基，对照组细胞用正常的DMEM培养基培养，37℃，5% CO2的条件下培养细胞12 h。……