刘 怡，李 娟

(四川省成都市第二人民医院皮肤科 610017)

成纤维细胞的活化、迁移、增殖，促使了Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的合成从而导致其在组织中的过度沉积是纤维化疾病的主要致病机制[1]。转化生长因子-β1(TGF-β1)是间质纤维化的关键细胞因子之一，可直接由成纤维细胞分泌，并作用于成纤维细胞，使其转化为肌成纤维细胞，促进其增殖并合成胶原，诱导纤维连接蛋白等的产生，提高成纤维细胞细胞外基质合成和沉积，增强细胞收缩的功能，同时抑制蛋白酶和基质酶的活性[2-3]。若能有效抑制TGF-β1对胶原蛋白的促进合成作用，则可对瘢痕等纤维化疾病有一定的治疗作用。胶原三螺旋重复蛋白1(collagen triple helix repeat containing 1,Cthrc1)是一种表达在受损动脉外膜及内膜的分泌型蛋白[4]。Cthrc1基因的表达和动脉损伤的修复相关联，其表达和外膜的纤维化保持一致[5]。本研究发现在成纤维细胞中Cthrc1呈TGF-β1依赖性升高，Cthrc1特异性地抑制TGF-β1的促胶原蛋白合成作用。通过阐释Cthrc1与TGF-β1相互之间的关系对成纤维细胞胶原蛋白合成的影响，将对治疗纤维化相关疾病提供一定的治疗思路，现报道如下。

1 材料与方法

1.1细胞与试剂 人成纤维细胞株购自中国科学院昆明细胞库。CCK-8试剂盒购自欣博盛生物有限公司。羟脯氨酸(Hyp)测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。Cthrc1正向引物：5′-CAA GGA AGC CCT GAA ATG A-3′，反向引物:5′-TCC ACT AAT CCA GCA CCA A-3′；β-actin正向引物：5′-AAG GCC AAC CGC GAG AA-3′，反向引物：5′-CCT CGT AGA TGG GCA CA-3′，均购自大连宝生物工程有限公司。重组人TGF-β1因子购自美国PeProTech公司。Cthrc1-siRNA单基因套装购自广州锐博生物科技有限公司。

1.2方法

1.2.1细胞培养与分组 成纤维细胞分别接种在RIMP 1640完全培养基(10%胎牛血清，100 mg/mL的链霉素、1×104U/L青霉素)常规培养(37 ℃、5% CO2)。……