黄倩 解方为

[摘要] 目的 探討ⅢB/Ⅳ期非小细胞肺癌（NSCLC）患者放射治疗前后中医辨证分型与RAD51之间的关系。方法 选择2015年5月～2018年5月解放军联勤保障部队第四七六医院肿瘤科收治的ⅢB/Ⅳ期NSCLC患者85例，在放疗前后给予中医辨证分型，并通过酶联免疫吸附测定试验检测患者血清RAD51水平。比较NSCLC患者放疗后中医证型变化情况、临床疗效、放射性肺炎发生情况、RAD51表达变化情况及放疗疗效与RAD51的关系。 结果 NSCLC患者放疗后肺郁痰瘀、阴虚痰热、脾虚痰湿证型比例与放疗前比较，差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。不同证型患者临床疗效差异有统计学意义（P < 0.05），放射性肺炎分级差异无统计学意义（P > 0.05）。放疗后肺郁痰瘀、阴虚痰热、脾虚痰湿证型患者RAD51表达水平明显低于放疗前，差异有高度统计学意义（P < 0.01），气阴两虚证患者放疗前后RAD51表达水平差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 放疗前后中医辨证分型和RAD51表达情况对预测NSCLC放疗疗效具有重要意义。放疗后RAD51表达情况可以作为中医辨证分型的依据。RAD51与中医证型可以相辅相成，共同指导个体化放疗。

[关键词] 非小细胞肺癌;放疗;辨证;RAD51

[中图分类号] R735.2          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）08（b）-0102-04

[Abstract] Objective To investigate the relationship between traditional Chinese medicine syndrome differentiation and serum levels of RAD51 in patients with stage ⅢB/Ⅳ non-small cell lung cancer （NSCLC） before and after radiotherapy. Methods From May 2015 to May 2018， 85 patients with stage ⅢB/Ⅳ NSCLC admitted to the Department of Oncology of No.476 Hospital of the Joint Logistics Team of PLA were selected. The syndrome differentiation of traditional Chinese medicine was carried out in these NSCLC patients before and after radiotherapy， and serum levels of RAD51 were measured by the enzyme-linked immunosorbent assay method. The changes of traditional Chinese medicine syndromes， clinical efficacy， occurrence of radioactive pneumonia， expression changes of RAD51 and the relationship between radiotherapy efficacy and RAD51 in NSLCL patients were compared. Results After radiotherapy， the percentage of NSLCL patients with syndrome of lung stagnation and phlegm and blood stasis， yin deficiency phlegm heat， spleen deficiency with damp phlegm had statistically significant differences compared with those before radiotherapy （P < 0.05 or P < 0.01）. The differences of clinical efficacy in different syndrome types were statistically significant （P < 0.05）. There was no statistically significant difference in the classification of radiation pneumonitis （P > 0.05）. After radiotherapy， the expression of RAD51 in patients with the syndrome of lung stagnation phlegm and blood stasis， yin deficiency phlegm heat， spleen deficiency with damp phlegm were significantly lower than those before radiotherapy， the differences were highly statistically significant （P < 0.01）. There was no significant difference in the expression of RAD51 in the patients with syndrome of deficiency of both qi and yin before and after radiotherapy （P > 0.05）. Conclusion Traditional Chinese medicine syndrome differentiation and RAD51 expression before and after radiotherapy are important for predicting the efficacy of NSCLC radiotherapy. The expression of RAD51 after radiotherapy can be used as the basis of traditional Chinese medicine syndrome differentiation. RAD51 and traditional Chinese medicine syndromes can complement each other to guide individualized radiotherapy. The expression of RAD51 after radiotherapy can be used as the evidence of traditional Chinese medicine syndrome differentiation. RAD51 and traditional Chinese medicine syndromes complement each other and serve as an effective way to guide individualized radiotherapy.

[Key words] Non-small cell lung cancer; Radiotherapy; Syndrome differentiation; RAD51

肺癌是世界病死率最高的肿瘤，发病率和死亡率呈逐年上升趋势[1-2]。放化疗是肺癌的主要治疗手段。放疗方面，肺癌属于放射中度敏感肿瘤[3-4]。放射技术的进步在很大程度上减少了癌细胞周围正常组织的放射性损伤，但放疗疗效仍受制于肿瘤细胞本身对放射线的抵抗[5]。要提高放疗疗效，克服放疗抵抗，就要解决恶性肿瘤患者个体差异的问题。RAD51是参与同源重组的一种关键基因，其编码的蛋白具有细胞周期依赖性、S期和G2/M期高表达等特点。研究指出，RAD51与放疗敏感性密切相关[6-11]。中医学是一个伟大的宝库，尤其是中医辨证施治理论与个体化治疗理念不谋而合。现代研究已经证实，中医药在放疗增效减毒方面发挥重要的作用[12]。因此本研究收集非小细胞肺癌（NSCLC）患者，在放疗前后检测中医证型变化，并结合RAD51表达变化和放疗疗效、副作用判定，探讨NSCLC患者放疗前后中医证型变化与RAD51的关系，以期为NSCLC放疗个体化治疗提供依据，并为临床的辨证治疗提供一定的帮助。

1 资料与方法

1.1 诊断标准

NSCLC的诊断参照《现代肿瘤学》[13]中的相关标准，并经组织病理确诊。

1.2 一般资料

本研究纳入2015年5月～2018年5月解放军联勤保障部队第四七六医院肿瘤科病房收治的ⅢB/Ⅳ期NSCLC患者85例，给予放射剂量50～70 Gy/5～7周。其中男57例，女28例，年龄32～70岁，平均（55.4±10.2）岁。所有患者均完成放疗，且不具有影响病症观察的其他并发症。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者均已签署知情同意书。

1.3 纳入与排除标准

1.3.1 纳入标准  ①年龄18～75岁;②符合上述诊断标准且临床分期为ⅢB/Ⅳ期;③卡氏功能状态评分（KPS）≥60分，预计生存期>3个月。

1.3.2 排除标准  ①合并感染性肺炎、肺结核等其他肺基础疾病;②合并精神病，糖尿病，消化道出血，心、肝、肾、甲状腺疾病及血液系统病史。

1.3.3 脱落标准  ①中途放弃治疗;②失访或数据不完整。

1.4 方法

由1名中医医师记录放疗之前1周内及放疗结束时NSCLC患者中醫证候信息，并记录3次中医辨证的“四诊资料”。根据周岱翰主编《中医肿瘤学》[14]中的原发性肺癌章节，将肺癌中医证型分为肺郁痰瘀证、阴虚痰热证、脾虚痰湿证、气阴两虚证。

1.5 观察指标及疗效判定标准

观察NSCLC患者放疗前后的中医辨证分型变化规律和生活质量，比较NSCLC患者不同证型的临床疗效和放射性肺炎发生情况，测定NSCLC患者放疗前后不同证型的RAD51表达情况。

1.5.1 生活质量评估  生活质量的评价以KPS评分为指标。治疗后较治疗前评分增加≥20分为显著改善，增加≥10分为改善，无增加为稳定，减少≤10分为降低[15]。

1.5.2 放疗疗效评估  根据实体瘤疗效评价标准1.1评估放疗疗效[16]。完全缓解（CR）：病灶全部消失，持续时间≥4周;部分缓解（PR）：病灶缩小≥30%，持续时间≥4周;病情稳定（SD）：介于PR和PD之间;病情进展（PD）：病灶增加>20%，或出现新病灶。

1.5.3 急性放射性肺炎分级标准  采用美国肿瘤放射治疗协作组织（RTOG）分级标准评价急性放射性肺炎分级[17]。0级：无变化;1级：轻微干咳或用力时呼吸困难;2级：持续性咳嗽，需要麻醉性镇咳药，轻微用力时呼吸困难，X线无变化或有轻微棉絮状或片状影;3级：严重咳嗽，麻醉性镇咳药无效，安静时呼吸困难，X线呈致密影，需间断性吸氧或激素治疗;4级：呼吸功能不全，需持续性吸氧或辅助机械通气;5级：致命性呼吸困难。

1.5.4 RAD51表达  所有NSCLC患者于放疗前1 d及放疗结束后4周内抽取空腹外周静脉血5 mL，室温放置30～60 min后，5000 r/min离心（离心半径5 cm）10 min分离血清，将血清分别放入2 mL Eppendorf管中，采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清游离状态的RAD51表达量。各项操作严格按照血清RAD51的ELISA检测试剂盒（湖北武汉优尔生商贸公司，货号：SEP750H）说明书进行操作。用BIO-RAD 550型酶标仪于490 nm处分别测的OD值，根据标准曲线得出浓度。

1.6 统计学方法

采用SPSS 20.0软件进行数据分析，计数资料采用χ2检验，等级资料比较采用秩和检验，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组内比较采用t检验，组间比较采用方差分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 放疗前后中医证型变化情况

2.2 NSCLC患者放疗前后的KPS评分比较

放疗前NSCLC患者KPS评分为（73.00±4.83）分，放疗后为（81.00±7.38）分，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。

2.3 不同证型患者临床疗效及放射性肺炎分级

不同证型放疗疗效差异有统计学意义（P < 0.05）。放疗后4种证型患者的放射性肺炎分级情况比较差异无统计学意义（P > 0.05）。见表2。

2.4 不同证型患者RAD51表达水平比较

放疗前4种证型患者RAD51表达差异无统计学意义（P > 0.05）。与放疗前比较，除气阴两虚证型外，其他3种证型患者放疗后RAD51水平均明显下降，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。4种证型患者放疗后RAD51表达差异有高度统计学意义（P < 0.01）。见表3。

3 讨论

研究指出，RAD51在肺癌、乳腺癌、肠癌、卵巢癌等多种肿瘤中存在高表达，且与预后密切相关[18-20]。另外，RAD51也与放疗敏感性存在相关性，降低RAD51表达可能提高放疗敏感性[6-11]。本研究对NSCLC患者放疗前后血清RAD51表达情况进行比较后发现，放疗后RAD51水平明显低于放疗前，且RAD51水平与放疗疗效的关系进一步证实上述观点。

放疗也是一种热毒之邪，放疗期间会加重热毒凝聚，进一步灼伤津液，伤及正气。本研究显示，放疗前NSCLC患者各中医证型的分布规律为肺郁痰瘀证>阴虚痰热证>脾虚痰湿证>气阴两虚证。随着放疗进行，津液渐亏，各证型向阴虚痰热证转化的例数增多。

本研究对RAD51在NSCLC放疗前后中医证型中的表达进行了研究。结果显示，肺郁痰瘀证、阴虚痰热证和脾虚痰湿证患者RAD51表达水平在放疗前后存在显著差异，但对于气阴两虚证患者来说，RAD51水平降低并不明显（P > 0.05），提示放疗后RAD51的表达情况可以作为中医辨证分型的依据。RAD51与中医证型可以相辅相成，共同作为预测和判别放疗效果的有效方式，指导个体化放疗。

综上所述，NSCLC患者在放射治疗前后中医辨证分型的分布和RAD51水平的变化提示放射线作为热毒之邪入侵人体后，内在DNA修复相关因子发生变化，以中医证型显示出来。放疗后肺郁痰瘀证、阴虚痰热证和脾虚痰湿证的NSCLC患者在宏观上和微观上的差异性较为显著。因此，中医辨证分型对指导NSCLC个体化放疗具有重要意义，RAD51水平对验证中医辨证分型和预测放疗效果具有重要作用，甚至可以作为中医规范化辨证的量化指标。

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（收稿日期：2019-12-03  本文编辑：张瑜杰）