血尿酸水平的影响因素及与SLC2A9基因多态性的关系

2019-09-17何雪琴任燕妮王宏保王海燕

国际检验医学杂志 2019年16期

何雪琴,任燕妮,王宏保,李微,周坛,王海燕

(同济大学附属杨浦医院心内科，上海 200090)

随着生活水平的不断提高，高尿酸血症(HUA)的发生率呈明显上升趋势，患病率为3%～10%，其中20%可发展为痛风，同时研究发现HUA是心血管疾病的独立危险因素[1]。近年来，越来越多的研究表明血尿酸(UA)水平受遗传因素的影响[2]。SLC2A9基因作为一种最有效的UA转运体，可编码人葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)，对维持UA水平的稳定具有重要作用。SLC2A9基因多态性的研究愈发引起关注，现已在不同民族、不同人群中发现其与血UA水平及痛风密切相关，全基因组关联分析(GWAS)发现SLC2A9基因是影响体内血UA水平的关键基因[3-4]。本研究通过调查体检人群HUA的患病情况，探寻导致血UA水平变化的影响因素，分析UA与SLC2A9基因多态性的关系，以期为HUA的发生、发展提供病因线索，为基因筛查提供理论依据。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2018年6-10月在上海市杨浦区中心医院健康体检中心接受体检的人群共2 000例。纳入标准：上海市杨浦区常住居民；年龄20～60岁，各项检测指标及资料完整。排除标准：严重肝肾功能不全、恶性肿瘤、甲状腺功能异常、自身免疫性疾病，以及正在服用利尿剂等影响UA药物的人群。其中男1 068例，女932例，年龄20～60岁，平均(39.2±5.7)岁。

1.2方法

1.2.1健康检查由健康体检中心专职医师和护士测量身高、体质量、腰围、臀围、血压；抽取空腹肘正中静脉血3 mL，采用贝克曼AU480全自动生化分析仪及其配套试剂盒检测空腹血糖(FBG)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、UA等。另抽取3 mL肘正中静脉血，放置于乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管保存在-18 ℃的冰箱内备用(用于检测基因多态性)。

1.2.2基因多态性检测对备用的3 mL静脉血提取DNA，采用改良PCR技术进行基因扩增。使用Sequenom MassARRAY Assay Design 3.0 Software设计SLC2A9基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs2241480的引物。上游引物：5′-ACG TTG GAT GCC ACT ACC TTC TCC CAT CAC-3′，下游引物5′-ACG TTG GAT GAA TGA GGG GCT ATA AGT CGG -3′。PCR反应条件：95 ℃预变性5 min，95 ℃变性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，共进行40个循环；最后72 ℃延伸5 min。委托专业测序公司进行引物合成，并将经琼脂糖凝胶纯化回收的PCR产物进行基因多态性进行检测。

1.3诊断标准和相关定义

1.3.1高血压收缩压≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 3 Kpa)和(或)舒张压≥90 mm Hg 或血压虽<140/90 mm Hg，既往有高血压史，目前正在服用抗高血压药。

1.3.2糖尿病 FBG≥7.0 mmol/L或正在接受降糖药物治疗。

1.3.3血脂异常 TC≥5.7 mmol/L 或LDL-C≥3.6 mmol/L或HDL-C≤1.0 mmol/L或TG≥1.7 mmol/L。

1.3.4HUA 正常嘌呤饮食状态下非同日2次空腹血UA水平男性>420 μmol/L或女性>357 μmol/L[5]。

1.3.5超重和肥胖计算体质量指数(BMI),BMI=体质量(kg)/身高2(m2)，BMI 24.0～27.9 kg/m2为超重，≥28.0 kg/m2为肥胖。

1.4分组根据血UA水平[6]，将体检人群分为3组，高UA组(男性>420 μmol/L或女性>357 μmol/L)217例，低UA组(<119 μmol/L)78例，介于高、低UA组之间的纳入中UA组1 705例。

2 结果

2.1不同性别、年龄的HUA的患病情况在2 000例体检对象中，共217例检出HUA，患病率为10.85%。男性HUA患病率显著高于女性，差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄的HUA患病率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 不同性别、年龄的HUA的患病情况

2.2不同UA水平的体检者临床相关指标及SLC2A9基因多态性比较随着UA水平的增高，BMI、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、BUN、Cr明显升高，HDL-C明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。不同UA水平的体检者rs2241480位点基因的分型比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3HUA影响因素分析以是否患HUA(HUA=1，非HUA=0)为因变量，将性别(男=1，女=0)、BMI、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、HDL-C、BUN、Cr、rs2241480位点基因分型(CC=0，CT=1、TT=2)作为自变量引入模型进行多因素logistics回归分析。结果显示，男性、BMI、SBP是HUA的独立危险因素，HDL-C、rs2241480位点基因分型(CC)则是保护因素，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表2 不同UA水平的体检者临床相关指标及SLC2A9基因多态性比较

续表2 不同UA水平的体检者临床相关指标及SLC2A9基因多态性比较

注：-表示无数据

表3 HUA影响因素的logistics回归分析

3 讨论

长期以来，HUA一直被视为与心血管疾病密切相关。本组体检人群中，HUA总患病率为10.85%，接近全国平均水平，男性HUA 检出率为12.92%，显著高于女性8.48%，与陈涛等[7]研究结果基本一致，其主要的原因在于性激素水平及饮食习惯的差异，雌激素可促进女性血UA的排泄，降低血UA水平[8]。此外，本研究显示高UA人群中SBP、DBP、FBG、TG、TC、LDL-C均明显升高，而HDL-C则出现下降，表明HUA患者存在明显的血压升高、血糖与血脂代谢紊乱，随着UA水平的增高，罹患心血管疾病、代谢综合征的风险必将随之升高，应引起足够重视。多因素logistics回归分析进一步证实，SBP是HUA的独立危险因素，HDL-C则是保护因素(P<0.05)。因此，应加强对该地区人群的健康宣教及促进健康素养，倡导低嘌呤、低脂膳食的健康生活方式，从而减少心血管事件的发生。目前，多数研究集中于HUA对心血管疾病的危害，但关于低UA对机体的影响关注较少，以往被视为是没有临床意义的生化异常。但近年来研究发现，低尿酸血症提示机体存在肾小管疾病或其他疾病，可诱发肾衰竭等并发症[9]。MATSUO等[10]研究显示，SLC2A9基因突变造成肾性低尿酸血症，可能与GLUT9功能缺陷引起重吸收功能下降有关。DINOUR等[11]对存在严重遗传性低尿酸血症的家庭研究后发现，SLC2A9上L75R基因突变将对UA的正常重吸收造成严重影响。

大量研究已证实HUA的发病是环境、遗传因素共同作用的结果，其中后者对HUA与痛风的发生的影响占40%～70%，提示遗传因素在UA的合成、排泄、重吸收过程中扮演着重要角色，但其分子机制与遗传模式至今尚不明确[12-13]。近年来，HUA、痛风相关易感基因位点的研究一直是国内外研究的热点，相关报道认为HUA与多种基因不同位点的多态性有关，且GWAS已锁定的血UA水平变异相关易感基因位点仅解释约7%的UA变异，其中SLC2A9基因SNP与血UA水平密切相关[14]。有研究表明，SLC2A9基因对UA水平增高及诱发痛风具有潜在影响，女性高达5.3%～6.0%、男性占1.2%～2.4%，是目前影响力最大的易感基因位点[15]。

本文重点探讨SLC2A9基因rs2241480位点多态性与HUA的相关性。结果发现，随着UA水平的升高，rs2241480位点CC基因型比例明显增加，与张翻弟等[16]研究结果一致，说明rs2241480基因位点与UA水平存在一定相关性。YANG等[17]报道称，携带TT+CT基因型人群发生HUA的风险约为CC基因型的2.5倍。另有研究指出，SLC2A9基因能够促进UA从肾小管近曲小管上皮细胞向体外，从而发挥对血UA的直接调节作用[18]。在排除心血管疾病危险因素之后，多因素logistics回归分析显示，rs2241480位点CC基因型是HUA的保护因素(P<0.05)，说明SLC2A9基因SNP标志可作为潜在HUA的分子标志物。另有其他位点的多态性研究也得到类似结论，认为携带rs734553 TT基因型人群心血管事件的发生率是其他基因型的2倍以上(HR=2.04)[19]。由此可见，SLC2A9基因多态性位点在升高血UA的基础上，还可导致心血管事件的风险增加。