周旭峰 李江华 张爱华 魏晓丽 范宗宪 王桂梅 孙海燕

肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAM）是血液循环中的单核细胞受肿瘤微环境中细胞因子和趋化因子作用，进人肿瘤微环境后分化而成的成熟巨噬细胞，是浸润在肿瘤组织周围最多的免疫细胞，它可以分泌多种细胞因子，促进肿瘤的侵袭和转移[1，2]。本研究采用免疫组化方法检测TAM及微淋巴管在喉咽癌组织的表达情况，从而探讨TAM浸润在喉咽癌侵袭和发展中的作用及其与肿瘤预后的关系。

资料与方法

1 一般资料

随机抽取2004年1月～2013年12月间，在佳木斯大学附属第一医院耳鼻咽喉科接受手术的喉咽癌52例。其中男47例，女5例，年龄43～79岁，平均57岁。所有病例术前未行放化疗，标本经病理确诊，其中T1期4例、T2期15例、T3期10例、T4期23 例；高、中、低分化病例分别为 9、30、13 例；其中淋巴结转移者 21 例（N1、N2、N3分别为 7、13、1 例），无淋巴结转移31例；有远处转移9例。

2 主要免疫试剂及方法

DAB显色试剂盒、PV-6000免疫组化试剂盒、CD68兔抗人单克隆抗体等主要试剂购自福建迈新生物科技公司。标本石蜡包埋，做4um连续切片，免疫组化操作程序严格按照说明书执行，以PBS液代替一抗做阴性对照。

3 计数方法

CD68阳性表达位于巨噬细胞胞浆，呈黄褐色颗粒。每张免疫组化切片分别选取癌内及癌周不同组织CD68+TAM最为密集的5个视野，在400倍显微镜下进行CD68+TAM计数，根据CD68+TAM的中位数将标本分为高表达组和低表达组[3]。

4 统计学处理

采用SPSS 21.0软件进行数据分析，行方差齐性检验、t检验、χ2检验和Spearman相关分析，应用Kaplan-Meier进行生存分析和Log-rank法检验组间差异，以P<0.05为差异有统计学意义。

结果

1 喉咽癌组织CD68+TAM表达

喉咽癌组织CD68+TAM主要分布于癌内及癌周间质，呈片状分布，胞体较大，形状不规则。……