肝郁证雌性大鼠乳腺组织癌前因子的表达及柴胡疏肝散的干预作用
2019-09-13钱梦谢鸣张媛凤刘碧原李聪
钱梦, 谢鸣, 张媛凤, 刘碧原, 李聪
(北京中医药大学方剂学系,北京 100029)
基于此,本研究拟建立肝郁证雌鼠模型,观察该模型雌鼠乳腺组织的病理变化和癌前因子的表达及柴胡疏肝散的干预作用,为认识中医“肝郁”与女性乳腺病变关联的内涵(肝郁可能涉及女性乳腺癌前因子的异常表达)提供实验依据,并探讨柴胡疏肝散对防治肝郁证乳腺病的效用机制,现将研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1动物健康性成熟未孕Wistar雌鼠55只,9周龄,级别SPF/VAF,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,动物质量合格证号:SCXK(京)2012-0001。于北京中医药大学动物房常规饲养,饲养条件:光照节律12L∶12D(6∶00~18∶00);室温20~25℃;相对湿度(50±5)%。
1.2药物柴胡疏肝散组成(按21世纪课程教材《方剂学》第2版):柴胡6 g、陈皮6 g、川芎5 g、香附5 g、枳壳5 g、芍药5 g、炙甘草3 g。以上药物由北京同仁堂药业股份有限公司提供,药材经北京中医药大学中药鉴定教研室刘春生教授鉴定均为正品。采用水提醇沉法将药物制成颗粒,每g颗粒含5 g生药。使用前用蒸馏水配制成12.4%和3.1%浓度的药液。
1.3试剂瑞士——姬姆萨复合染液(上海源叶生物科技有限公司,批号:R20659);去甲肾上腺素(NE)酶联免疫吸附分析(ELISA)检测试剂盒(批号:20170520.60075R)、5-羟色胺(5-HT)ELISA检测试剂盒(批号:20170520.60087R)、多巴胺(DA)ELISA检测试剂盒(批号:20170520.60088R);肾上腺素(E)ELISA检测试剂盒(批号:20170520.60082R)、基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA检测试剂盒(批号:20170629.60045R)、生存素(Survivin)ELISA检测试剂盒(批号:20170629.60391R)、三叶因子1(TFF1)ELISA检测试剂盒(批号:20170629.60422R)、三叶因子3(TFF3)ELISA 检测试剂盒(批号:20170629.60423R)等均由北京瑞格博生物技术有限公司提供;促肾上腺皮……
