基于胃肠组织cAMP/PKA信号转导通路变化研究大鼠脾气虚证模型与线粒体损伤模型的相关性
2019-09-13王莹贾连群宋囡马艺鑫具星杨关林
王莹 , 贾连群 , 宋囡 , 马艺鑫 , 具星 , 杨关林
(1.辽宁中医药大学中医脏象理论及应用教育部重点实验室,辽宁沈阳 110847;2.辽宁省中医转化医学研究中心,辽宁沈阳 110847)
本课题组前期研究发现,脾气虚模型大鼠胃肠组织环磷酸腺苷——蛋白激酶A(cyclic adenosine monophosphate-protein kinase A,cAMP-PKA)信号转导通路发生变化[1,2]。cAMP-PKA途径是参与物质能量代谢的主要细胞传导通路[3],而线粒体是细胞能量生成的主要场所,是机体进行能量代谢的主要部位。中医脾为“气血生化之源”,可见,其“主运化”与线粒体能量代谢功能密切相关。研究表明,鱼藤酮处理可导致细胞线粒体产生氧化功能损伤,能量供给不足[4,5],是线粒体呼吸链上复合体I的经典抑制剂之一。故本研究将继续以cAMP-PKA信号转导通路作为切入点,通过比较脾气虚证模型与不同剂量鱼藤酮线粒体损伤模型大鼠胃肠线粒体cAMP-PKA通路相关基因及蛋白表达变化之相关性,来探讨脾气虚模型成模及其相关线粒体的可能机制,以期为临床脾气虚证的治疗提供理论基础,现将研究结果报道如下。
1 材料与方法
1.1动物SPF级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,购于本溪实验动物中心,动物质量合格证号:SCXK(辽)-2010-0001。SD大鼠饲养于辽宁中医药大学实验动物中心SPF级环境中,饲养条件符合国家二级标准,饲养室内的温度保持在(22±2)℃,相对湿度维持在(55±15)%,噪音<60 dB,昼夜明暗交替时间为12 h/12 h,每天经紫外灯照30 min杀菌。
1.2药物、试剂与仪器鱼藤酮油溶液(美国Sigma公司,批号:R8875-1G),由高压灭菌葵花油溶解鱼藤酮至2 mg/kg,配制成2.0、1.5、1.0 mL/kg等3个剂量[6]。抗β-actin抗体(北京中杉金桥公司);……
