刘红霞　吴孔阳　王露露　齐建勇　赵旭升

【摘 要】本文采用超声波辅助液-液萃取法，以灰枣枣叶绿茶为原料，用甲醇做萃取溶剂、三氯甲烷做富集溶剂、氯化钠溶液做提纯剂，再结合超声波提高提取率，最后取萃取后的下层有机相进行气相色谱-质谱（GC-MS）分析，從而得出枣叶绿茶的香气成分。由GC-MS分析的结果表明，枣叶绿茶中棕榈酸甲酯、亚油酸甲酯、油酸甲酯、棕榈酸的含量较高。

【关键词】枣叶绿茶;超声波辅助液-液萃取;GC-MS分析;香气成分

中图分类号： R284.1文献标识码： A文章编号： 2095-2457（2019）19-0109-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.19.051

0 引言

近年来，很多国内外学者对枣叶的活性成分做了研究，表明枣叶中含有三萜酸及其皂苷类、核苷类、氨基酸类、黄酮类化合物、酚酸类等多种类型的活性成分[1]。据有关学者研究，枣叶中黄酮的含量极其丰富，是主要的活性成分，而黄酮类化合物又是有效的自由基清除剂和抗氧化剂，因此为枣叶成为提取黄酮类化合物的原料提供依据[2]。

本文我们采用超声波辅助液-液萃取法检测枣叶绿茶的香气成分[3]，然后再将富集的液体进行气相色谱分析。超声波是一种强的弹性波，它能提高提取萃取效率，使溶剂和枣叶绿茶充分接触，从而有利于香气成分向提取溶剂转移。与其他技术相比，特别是针对从植物中提取成分，超声波辅助液-液萃取法的优越性就在于超声波能分解细胞膜，促进所含成分从植物细胞基质中释放，从而加强传质。此外，这种方法是在较低温度下操作的，有利于植物中所含的热不稳定成分。

1 材料与方法

1.1 材料

枣叶绿茶采于洛阳师范学院枣园

1.2 实验方法

经查阅文献得知，采用中心组合设计对主要因素进行优化，得出取200mg枣叶绿茶分别以甲醇和三氯甲烷为萃取溶剂和预富集溶剂，32℃下超声波水浴21min，54μL的三氯甲烷，7.4% NaCl 4mL为最佳反应条件。本文对优化后的实验方案再进行系统的设计，用GC-MS进行定性定量分析，进而检测出枣叶绿茶的香气成分。

1.2.1 香气成分的提取

分别取枣叶绿茶5g（扩大25倍）、6g（扩大30倍），在研钵中碾碎，分别加入50mL、60mL甲醇;再进行超声水浴，时间为21min，温度为32℃，超声功率为40KHz;在高速离心机内4000rpm，离心5min，进行固液分离。上层为深绿色上清液，下层为固体沉淀。分别加入12.5mL、15mL提取剂甲醇，短时间内溶液分层明显，再4000rpm，离心5min。取下层有机相，进行GC-MS分析。

2 气相色谱-质谱分析

采用GC2010Plus气相色谱质谱联用仪进行气相色谱分析，该仪器配备2台AOC-20i自动进样器和1台AOC-20s自动取样器自动进样系统联用构成的双自动进样系统和高灵敏度的FID检测器。GC-MS的气相色谱条件：色谱柱为Rtx-5MS石英毛细血管柱（柱长为30m，柱内径为0.25mm，粒径为0.25μm），进样口温度为220℃，溶剂延迟5min，氦气为载气，压力84.8Kpa，总流速为50.0mL/min，柱流速为1.52mL/min，线速度为44.5cm/sec，吹扫流速为5.0mL/min，不分流模式，进样量1μL。程序升温：起始温度为40℃，保留1min，以5℃/min速率升至250℃，保留40min。质谱条件：数据采集扫描模式为全扫描，离子源温度为250℃，离子源接口温度为250℃，电子轰击离子源（EI），电子能量为70eV，质量范围（m/z）为30-650amu，溶液延长时间为5min。

2.1 气相色谱-质谱分析结果

枣叶绿茶（5g）和枣叶绿茶（6g）分别稀释10倍进行GC-MS分析得到枣叶绿茶的香气成分、保留时间、定量离子、峰面积、峰高、浓度以及定性离子，经整理制成表格见表1和表2。

表1 枣叶绿茶（5g）GC-MS成分分析

表2 枣叶绿茶（6g）GC-MS成分分析

分别取5g、6g枣叶绿茶经萃取后得到的下层有机相，再进行GC-MS分析得到枣叶绿茶香气成分的色谱图，结果见图1和图2。

3 总结

本文灰枣枣叶绿茶采用超声波辅助液-液萃取法做前处理，再进行GC-MS分析。用甲醇做萃取溶剂、三氯甲烷做富集溶剂、氯化钠溶液做提纯剂，再结合超声波提高提取率，最后取萃取后的下层有机相进行气相色谱-质谱（GC-MS）分析，从而检测出枣叶绿茶的香气成分。在实验中分别取质量为5g和6g的枣叶绿茶作为样本，得出GC-MS分析的结果：枣叶绿茶（5g）检测出三种成分，分别为棕榈酸甲酯、亚油酸甲酯、油酸甲酯;枣叶绿茶（6g）检测出四种成分，分别为棕榈酸甲酯、亚油酸甲酯、油酸甲酯、棕榈酸。，原因可能是（1）样品量过少（2）该成分在实验过程中被破坏。

【参考文献】

[1]张颖，郭盛，朱邵晴，徐璐，严辉，钱大玮，段金廒.不同干燥方法对酸枣叶中核苷类、氨基酸类及黄酮类成分的影响[J]. 食品工业科技，2016（09）：296-303.

[2]蔡凌云，韩素菊，肖杭，邹利娟.密蒙花总黄酮抗氧化活性[J].光谱实验室，2011（03）：1343-1346.

[3]曾里，夏之宁.超声波和微波对中药提取的促进和影响[J].化学研究与应用，2002（03）：245-249.