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高白鲑肌肉蛋白质组双向电泳技术体系的优化

2019-08-07于亚文朱新荣

中国食品学报 2019年7期

于亚文 朱新荣 张 建

(石河子大学食品学院 新疆石河子832000)

蛋白质组(Proteome)于1994年首次提出,定义为“由基因组所表达的全部蛋白质”[1]。近年来,蛋白质组学技术发展迅速,已成为生命科学研究中的重要领域。而双向电泳 (Two-dimensional electrophoresis,2-DE) 技术是目前蛋白质组研究技术的标准方法[2]。双向电泳的分辨率较高,近年来,在医学、农业和微生物学等研究领域广泛运用[3]。目前,国内对于双向电泳主要用于分离蛋白质以及后续蛋白质组学的研究。徐永杰等[4]研究了猪肌肉组织双向电泳分离条件的建立及常见问题;梁光明等[5]研究凡纳滨对虾肌肉蛋白质双向电泳分离技术的建立;王任等[6]建立大黄鱼肌肉组织双向凝胶电泳方法;丁勤学等[7]就双向电泳技术中样品上样方式及水化上样等做出讨论。目前关于高白鲑的研究,主要集中在营养养殖、贮藏保鲜等方面,基于双向凝胶电泳技术的高白鲑肌肉组织蛋白尚未见报道。

高白鲑属鲑科、白鲑属,为冷水性鱼类。营养全面,肌肉蛋白质含量平均为18.83%,氨基酸含量平均为17.48%,其中必需氨基酸含量为9.16%,占氨基酸总量的52.40%[8],并且肉质鲜美,备受消费者喜爱,具有重要的经济和营养价值。同时由于其营养价值丰富,水分含量较高,易腐败变质。如贮藏不当,鱼肉的蛋白质、氨基酸等会分解变质,对鱼肉品质产生不利影响[9]。本研究以高白鲑为试验材料,通过对蛋白质样品的制备方法、上样量、IPG 胶条的pH 范围、等电聚焦程序、助凝剂剂量、SDS-PAGE 凝胶浓度及染色……

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