叶长烂,周 霞,谢浩然,马金魁，张宏斌

(南部战区总医院医学实验科,广东广州 510010)

噬菌体展示技术 (PDT)于上世纪八十年代末提出并建立，以噬菌体或噬菌粒为载体，是重组蛋白、单链抗体、酶、脂蛋白及短肽的一种表达系统[1]。由此衍生的多种噬菌体展示文库，已广泛用于研究蛋白质之间或蛋白与非蛋白、生物分子与其他物质之间的相互作用，结合物或模拟表位筛选等[2-7]。然而，应用噬菌体展示库筛选获得的靶分子结合物，其亲和力等生物活性均较天然配体低。构建并筛选次级噬菌体库即突变库是将初筛序列变为理想序列的有效途径之一。突变文库是对初次筛选所获序列中的某些位点或片段(特异或随机位点)在DNA水平上进行突变，再以噬菌体或噬菌粒为载体构建次级文库以获得更高亲和力的序列。多肽因具有易制备、便于改造、免疫原性低等优点，在药物筛选和治疗上的重要性越来越受到研究者的重视。多肽根据肽键的结构分为直链肽和环肽，其中直链肽的研究最为广泛和深入，常用的噬菌体随机肽库中插入的基因经噬菌体表达后往往也是以线性直链肽的形式展示在噬菌体表面，但直链肽进入体内后容易在各类酶的作用下发生快速降解，而经过调整后的环肽在二硫键或其他结合键的作用下会形成固定构象，不但代谢稳定性和生物利用度会极大提高，而且更符合受体-配体(抗体-抗原)构象的结合要求。

噬菌体展示随机肽库因其构建、改造及筛选的易操作优势使其最受关注。……