重组人乙酰胆碱酯酶基因在毕赤酵母中分泌表达及其对农药的敏感性评估
2019-07-08杨芳芳李佳慧张赛南王珍廖志银王首锋
浙江大学学报(农业与生命科学版) 2019年3期
杨芳芳,李佳慧,张赛南,王珍,廖志银,王首锋,3*
(1.浙江大学基础医学系,杭州 310058;2.绿城农科检测技术有限公司,杭州 310052;3.浙江省微生物生化与代谢工程省级重点实验室,杭州 310058)
在过去30年间,有机磷和氨基甲酸酯类农药在全世界得到了广泛的应用,由此引发了许多的食品安全问题[1-3]。我国是农业大国,为了提高粮食产量,对农药的依赖性越来越强,而有机磷和氨基甲酸酯类农药具有高效、低毒、低残留、防治效果好、防治对象多、应用范围广等特点,是目前使用最广泛的一类农药。有研究表明,有机磷和氨基甲酸酯类农药在特定的环境下会在食品中残存较长的时间,既可以在水果、蔬菜等农作物中残留,也可以在动物体内累积。为了提高产量和防治病虫害而大量施用农药使得农作物中农药残留超标的现象非常严重,给食品安全和人类健康造成了严重的威胁[4],因此,找到快速检测农药残留方法对于控制食品安全隐患具有重要意义。
酶抑制法是目前检测有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的主要技术,具有简便、灵敏、经济、快速的特点。在酶抑制法中酶最为关键。酶抑制法的基本原理[5]如下:在正常生理情况下,乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)可以选择性水解乙酰胆碱成为胆碱和乙酸。而有机磷和氨基甲酸酯类农药能够特异性抑制乙酰胆碱酯酶的活性,因此,乙酰胆碱酯酶成为酶抑制法的关键酶。将乙酰胆碱和乙酰胆碱酯酶吸附在滤纸片上,加入特定显色剂后,根据滤纸片颜色的变化来判断酶反应产物生成量的多少,进而判定样品中是否存在有机磷及氨基甲酸酯类农药[6]。……
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