刘海培,姜小梅,韩文念，许舒欣，李 艳，汪 曣，蒋学慧*

(1.天津大学 精密仪器与光电子工程学院，天津 300072；2.天津国科医工科技发展有限公司，天津 300399)

维生素是维持人体健康所必需的物质，其缺乏或过量均会影响人体代谢平衡。其中，维生素A(VA)、维生素D3(VD3)、维生素E(VE)为脂溶性维生素，具有促进机体生长发育，调节生理机能，增强免疫的作用[1]，可在体内大量贮存，属于人体内源性代谢物。通过检测维生素的含量可评估患者体内的营养状况，目前的测定方法主要有酶免疫法[2]、化学发光免疫法[3]及质谱法等。其中，液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法[4-5]具有高精确度、高灵敏度和可实时监测的优势，对于维生素缺乏的临床判断、治疗管理具有辅助诊断的作用[6-7]。

液相色谱-质谱联用技术用于内源性代谢物的实际分析时，真实的生物基质(Authentic matrix)中含有的待测物质会影响标准样品浓度，从而影响定量结果的准确性[8-9]。目前常采用牛血清白蛋白(BSA)等替代基质(Surrogate matrix)[10-11]来模拟生物基质，或采用活性炭吸附等前处理手段从真实生物基质中得到已去除内源性代谢物的剥离基质(Stripped matrix)[12]。然而此方法成本高，且可能破坏除内源性代谢物以外的基质成分或者内源性代谢物去除不完全，影响样本原有信息，从而导致基质效应问题[13-14]。另外一些新开发的方法无法找到合适的空白基质，给定量分析增加了难度。

本研究利用LC-MS/MS对人体血清中维生素A、维生素D3和维生素E 3种脂溶性维生素进行同时检测，以混合人血清基质中加入标准品并结合同位素内标法建立标准曲线进行定量，通过对内源性代谢物本底扣除的方法，解决了模拟基质下检测的标准品与待测基质不匹配的问题，并与BSA模拟基质方法的检测结果进行对比。……