支原体肺炎儿童与健康儿童血清拉曼光谱检测的差异性研究*
2019-06-21林小平刘晓良苏艳丽
林小平,刘晓良,余 瑶,赵 芳,苏艳丽
(商洛市中心医院检验科,陕西商洛 726000)
近年来,肺炎支原体肺炎(mycoplasmapneumoniaepneumonia,MPP)在儿童中的发病率呈现出逐渐上升的趋势,尤其是3~7岁的儿童,发病率约为44%,并且患儿的年龄趋于低龄化[1-2],而肺炎支原体(mycoplasmapneumoniae,MP)是儿童发生MPP的主要原因[3]。目前对MP的实验室诊断方法主要有病原体分离培养技术和核酸检测技术、血清学诊断技术等方法,但是这些检测方法目前都存在一定的局限性[4]。基于现有的MP诊断状况,发展一种高灵敏度和便捷的检测手段,对于该病的早期诊断具有非常实用的医学价值。
拉曼光谱技术分析速度快、所需样品浓度低、无需预处理样品、不破坏样品、灵敏度较高,现已成为生物医学诸多研究领域中的有力武器[5]。本研究检测MPP患儿和健康儿童的血清拉曼光谱信号,研究其差异性,初步探索将拉曼光谱检测技术应用到儿童MPP诊断的可行性。
1材料与方法
1.1 研究对象 选取商洛市中心医院2017年4~12月收治的MPP患儿血清100例作为实验组,年龄在8个月~14周岁。另选取同期正常儿童血清100例作为对照组,所有样本均在早晨空腹抽血分离血清待测。
1.2 仪器 采用HORIBA公司的XploRA PLUS全自动显微拉曼系统。
1.3 方法 根据本课题组优化好的血清样本测试方法,选取血清2.5 μl,点至载玻片上,静置孵育30 min;使用全自动显微拉曼系统检测。测试条件如下:激光波长532 nm,光栅1 800 g/mm,激光功率100%,采集时间25 s,采集次数1次,光谱范围400 cm-1~1 800 cm-1。为了减少电噪音、宇宙射线以及光功率波动等不利因素的影响,每个样本测量3次,取平均值,所得光谱进行归一化处理后用于分析。……
