刘学刚 刘艳彩 吴春平 李景光 赵岭岭 张浩 彭晓兵 张振亚

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）每年引起约60万人死亡，是目前世界范围内最常见的恶性肿瘤之一［1-2］。转移性CRC患者生活质量低，预后差，其5年生存率仅约为10%［3］。近年来，随着对肿瘤发生发展及转移机制研究的不断深入，人们发现血管生成在CRC的生长及转移过程中扮演着重要的角色［4］。

在CRC中，对血管增生起重要作用的细胞因子有多种，如：血管内皮生长因子（vascular endothelial cell growth factor，VEGF），整合素（integrin），β-连环蛋白（β-catenin）等［5］。β-catenin蛋白主要定位于细胞膜上，在细胞的增殖和凋亡等方面发挥重要作用，与肿瘤的发生发展密切相关［6］。近年来研究发现β-catenin可以调控VEGF的表达，在CRC新血管生成中具有关键作用［7］。此外，研究还发现多种基因可调控β-catenin的表达从而影响肿瘤血管增生，如：HIPK2，COX-2等［8-9］。

CD151是一种膜蛋白，属于四跨膜蛋白超家族，在多种肿瘤中呈高表达，参与肿瘤的增殖、侵袭及迁移等过程，且与肿瘤不良预后相关，还可以介导血管生成［10］。已有相关研究报道，CD151可影响Wnt信号通路的起始蛋白LRG-1和LGR-5的表达［11］，然而在CRC中，关于CD151与Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin蛋白以及血管生成之间却鲜有报道。本研究选用HT-29和CD151--HT-29细胞，通过Real-Time PCR及Western blot技术，观察细胞β-catenin的表达变化；通过裸鼠皮下成瘤实验观察移植瘤的生长以及血管生成情况。

材料与方法

一、主要试剂

DMEM培养基（杭州四季青生物工程材料有限公司），胰蛋白酶（上海源叶生物科技有限公司），BCA蛋白分析试剂盒（美国Thermo公司），β-actin抗体（美国Abcam公司），Trizol裂解液（美国Becton-dickinson公司）。

二、试验方法

1.细胞培养：对CRC细胞系用10%胎牛血清的DMEM培养基培养。……