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一种基于重组截短Gcaa407~614蛋白的赤羽病病毒抗体间接ELISA方法的建立

2019-05-21王建华陈本龙张俊哲王玉玲

中国动物检疫 2019年5期
关键词:血清检测

王建华,赵 丹,陈本龙,张俊哲,王玉玲,肖 妍

(天津海关,天津 300456)

赤羽病是由赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)引起的牛、绵羊和山羊等动物的一种通过吸血蚊和库蠓等传播的虫媒传染病,临床上以流产、早产,产死胎、木乃伊以及胎儿畸形、新生胎儿关节弯曲和积水性无脑综合征为特征[1]。本病主要在非洲以及澳大利亚、日本和韩国等一些热带和亚热带地区流行[2-5]。20世纪90年代以来,我国上海、天津和新疆等地均有本病的报道[6-7]。该病给流行国家及地区的牛、羊养殖业造成了一定经济损失。随着全球性气温变暖,本病流行的范围和时间呈扩大和延长趋势,对我国牛、羊养殖业的威胁不容忽视。在病毒学分类上,AKAV属于布尼病毒科(Buny aviridae)布尼病毒属辛布(Simbu)病毒血清群成员,为单股负链RNA 病毒。其基因组由大(L)、中(M)、小(S)3个RNA 片段构成,其中M RNA 编码1个由1 401个氨基酸组成的M蛋白前体。该前体进一步裂解为Gn 和Gc囊膜糖蛋白和1个非结构Nsm蛋白[8-9]。研究证实,AKAV Gc蛋白为由869个氨基酸组成的囊膜蛋白,不仅参与病毒粒子对宿主细胞的侵入、装配和成熟过程,也可刺激动物机体产生中和抗体[10-12],提示该蛋白可作为检测AKAV抗体的候选抗原之一。针对AKAV血清抗体的检测,目前国内外已建立了琼脂凝胶免疫扩散试验、血凝抑制试验和微量血清中和试验(SNT)。这些方法特异性较好,但敏感性较低。酶联免疫吸附试验(ELISA)结合仪器设备特别适合大量血清样本的抗体检测,是当前国内外多数动物疫病血清抗体检测的首选方法和研发重点。……

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