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三种小果荨麻提取物体外抑菌作用研究

2019-05-14刘丽霞刘丹

医药前沿 2019年10期
关键词:荨麻培养箱恒温

刘丽霞 刘丹

(1 昆明市食品药品检验研究所 云南 昆明 650034)

(2 云南省第二人民医院药剂科 云南 昆明 650051)

小果荨麻(Urtica atrichocaulis(Hand.-Mazz.)C.J.Chen)为荨麻科荨麻属、多年生野生草本植物,有木质化的根状茎,分布于贵州西南部、四川和云南海拔300-2600米山脚路旁、山谷或沟边[1]。荨麻全草富含多种维生素、鞣质。茎皮主要含蚁酸、丁酸及有刺激作用的酸性物质[2]。茎皮纤维可供纺织用;全草可入药,具有祛风除湿、解痉、活血和止咳之功效,主要用于小儿高热惊风,痉挛抽搐,角弓反张,跌打损伤,扭伤,闪挫伤,金伤,风热湿痹,关节疼痛,四肢拘挛,腰膝疼,手足麻木,骨痛;外用疹出不畅,痘疹不透[3]。不同的提取溶媒得到的提取液有效成分存在差异,抑菌作用也随之改变。目前国内外主要针对同属的异株荨麻、麻叶荨麻等的研究,尚无关于小果荨麻的研究,对其抑菌特性也未见报道。

1.材料与方法

1.1 实验材料

供试菌种为表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、浅黄假单胞菌(Pseudomonas luteola)、肠膜明串珠菌乳脂亚种(Leuconostoc mesenteroides ssPcremoris)、缓慢芽孢杆菌(Bacillus lentus)、中间葡萄球菌(Staphylococcus intermedius)、无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、福氏志贺氏菌(Shigella fushigella)、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、乙型副伤寒沙门氏菌(Salmonella Paratyphi B)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、奇异变形杆菌(Proteus mirabilis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、藤黄微球菌 (Micrococcus luteus)、溶血性葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)、小牛葡萄球菌(Staphylococcusvitulinus),菌株均来自中国医学菌种保藏中心或实验室环境中分离后经鉴定的菌株。

小果荨麻[Urtica atrichocaulis(Hand.-Mazz.)C.J.Chen]于9月在盘龙区阿子营山坡旁采收地上部分,经过鉴定。

1.2 试剂

乙酸乙酯、无水乙醇,均为分析纯。

1.3 仪器

游标卡尺、MLS-3781L-PC压力蒸汽灭菌器、PYXDHS·500-BS-Ⅱ隔水式恒温培养箱、生物安全柜、电子天平。

1.4 培养基

胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA)

2.实验方法

2.1 供试液制备

称取3份干燥小果荨麻全草,每份10g,分别置于圆底烧瓶中,分别加入10倍量的纯化水、70%乙醇、乙酸乙酯,浸泡2h,加热回流提取30min,趁热过滤,滤液浓缩至10ml,作为供试品溶液;同法制备空白溶液。

2.2 菌液制备

取实验菌株接种至营养琼脂斜面上,置于37℃恒温培养箱中培养24h,取斜面上菌落至无菌生理盐水中,制成0.5麦氏单位的菌悬液,备用。

2.3 抑菌实验

取适量菌悬液,用无菌棉签均匀涂布于无菌TSA平板上,取6mm直径的无菌滤纸于带菌平板上,每个平板放5张,4张加入15μl的供试液,1张加入空白对照溶液,置于37℃恒温培养箱中培养24h,测量并记录抑菌圈直径,计算平均值。

3.结果

空白对照均无抑菌作用,不同溶媒提取的小果荨麻提取液的抑菌作用及抑菌圈均有所差异,结果见表1、表2。

表1 小果荨麻提取物的抑菌作用

表2 不同小果荨麻提取液抑菌圈直径

4.结论

从表1可以看出小果荨麻的醇提取液及水提取液对大多数革兰氏阳性、阴性菌均有抑制作用,与醇提取液相比,水提取液对金黄色葡萄球菌、福氏志贺氏菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门菌无抑菌作用;乙酸乙酯提取液对革兰氏阳性、阴性菌均无抑制。从表2可知,小果荨麻醇提取液比水提取液抑菌效力强。本次实验证明小果荨麻有明显的抑菌作用,为临床应用提供了科学依据,但小果荨麻提取液抑菌作用机制有待进一步研究。

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