文慧 刘珣 张尚青 杨婷 陈明丽 王建华

摘 要 检出限是判断或评价一种分析方法灵敏度的重要参数，与普通荧光探针相比，比率型荧光探针检出限的计算则比较复杂，多数情况下采用空白标准偏差的3倍与标准曲线斜率的比值作为检出限。而当比率荧光探针用于pH检测时，检出限尚无统一定义。本研究通过归纳总结发现，根据检测所得数据形式，可将比率型荧光探针分为3种，并据此设计了一种激发波长为365 nm、发射波长为600 nm/450 nm的模拟探针。通过对3种不同类型的pH比率型荧光探针检测的模拟数据进行分析，以光谱方法的检出限计算公式为原型，提出了检出限的计算公式。本方法可用于不同种类pH比率型探针方法灵敏度的比较。

关键词 比率型荧光探针; pH传感; 灵敏度; 模拟数据

1 引 言

荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、快速简便等优点，广泛应用于温度[1]、pH[2～4]、环境污染物[5，6]、重金属离子[7，8]、生物小分子[9～11]、细胞内物质[12，13]的传感分析，以及生物体[14]和细胞[15～17]成像。比率型荧光法以两个不同波长处荧光强度的比值作为响应信号，使得分析方法本身受外部环境等因素的影响大大减小。因此，比率荧光法的样品适用范围比直接荧光光谱分析法更广泛，通常具有更高的灵敏度和更好的选择性[18，19]。根据两个波长处荧光强度变化趋势的不同，可将比率型荧光探针分为四类：（1）一个波长处的荧光强度不变，另一个波长处的荧光强度变小[20，21];（2）一个波长处的荧光强度不变，另一个波长处的荧光强度变大[22];（3）一个波长处荧光强度变小，另一个波长处荧光强度变大[14，23];（4）两个波长处的荧光强度同时变大或变小[24]。……