栾正云，黄 燕，沙 敏，徐 捷，叶 军，郭 婷

（泰州市人民医院 中心实验室，江苏 泰州225300）

单核细胞在调节炎症和参与炎性反应中发挥重要作用。外周血单核细胞依据CD14、CD16 的表达强度分为三个亚群：Mon1、Mon2、Mon3，其中Mon1 具有吞噬、蛋白水解及促炎作用[1]，还能分泌促炎因子及粘附分子，能向发挥促炎作用的M1 型巨噬细胞分化，发挥免疫清除功能[2]。在炎症刺激的情况下，Mon2 单核细胞上的CD163被刺激并脱落，Mon2向Mon1转变[3]。这些不同亚群的单核细胞在疾病发生、发展中具有重要的意义。目前对单核细胞或单个核细胞检测结果受标本放置时间的影响有较多研究[4-7]，但有关标本放置时间对单核细胞中不同亚群检测结果的影响尚未见相关研究。我们比较标本采集后不同的放置时间对单核细胞不同亚群检测结果的差异，为单核细胞不同亚群的临床检测和科研工作提供依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 仪器 流式细胞仪（FACSCalibur，美国BD）产品，用CELLQuest软件（美国BD）获取和分析实验数据。

1.1.2 试剂 CD45-PerCP （Code NO:347464）、CD14-FITC（Code NO:347493）和同型对照Mouse IgG2a-FITC(Code NO:349051)由BD Bioscience 公司提供；PE Mouse Anti-Human CD16(Clone:3G8)同型对照Mouse IgG1-PE（Clone:349043）由BD Phamingen公司提供。

1.2 方法

1.2.1 标本采集及保存 样本来源于完全随机法选择的20例我院健康体检者，所有受试者均于空腹抽取外周静脉血2mL，EDTA-K2抗凝，标本第一次检测于采集后1小时之内，随后在25℃放置4小时、8小时测定。

1.2.2 标本染色处理 将试管分为两组，测定组加 入CD45-PerCP 和CD14-FITC、CD16－PE 各20µL，对照组加入CD45-PerCP 和Mouse IgG2a－FITC、Mouse IgG1-PE各20µL；将标本充分混匀，分别加50µL标本于上述两管中，震荡器上充分混匀，避光放置15min；分别加入溶血素各2mL，充分震荡，避光放置10min。1500rpm 离心5 min 弃上清，各加入生理盐水2mL 震荡，1500rpm 离心5min 弃上清，各加入生理盐水100µL，充分震荡混匀，待测。……