李宁 王国泰

【摘要】 目的：观察扶正泄浊保肾汤对慢性肾衰大鼠甲状旁腺激素（PTH）、肾功水平变化及中药的干预作用。方法：采用5/6肾切除法建立CRF大鼠模型;将60只雄性SD大鼠随机分为模型组，尿毒清组，中药大、中、小剂量组和假手术组;假手术组及模型组同时间予等体积的生理盐水灌胃，尿毒清组予以含原药0.25 g/ml的悬混液灌胃，中药组分别按临床成人用量的9倍、6倍、3倍配制不同剂量中药灌胃，疗程8周。检测各组大鼠PTH及Scr、BUN水平。结果：与假手术组比较，模型组大鼠PTH、Scr、BUN均明显升高，Hb及RBC均明显降低（P<0.05）;各给药组治疗后较模型组均有所改善，PTH、Scr、BUN降低（P<0.05），Hb及RBC升高（P<0.05）;其中以中药大、中剂量组为佳，两组之间差异无统计学意义（P>0.05）。结论：扶正泄浊保肾汤可以降低慢性肾衰大鼠PTH、Scr、BUN水平，改善临床症状，保护肾功，延缓肾衰竭的进展。

【关键词】 扶正泄浊保肾汤 CRF大鼠 甲状旁腺激素 血肌酐 尿素氮

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.30.001 文献标识码 A 文章编号 1674-6805（2019）30-000-03

[Abstract] Objective： To observe the intervention effect of Fuzheng Xiezhuo Baoshen Decoction on parathyroid hormone （PTH）， renal function in rats with chronic renal failure and TCM. Method： This case used 5/6 nephrectomy to establish a CRF rat model. Sixty male SD rats were randomly divided into six groups： a model group， a sham operation group， a group with Niaoduqing Granule and three TCM groups with large， medium and small doses of Fuzheng Xiezhuo Baoshen Decoction. The sham operation group and the model group were given equal volume of normal saline at the same time， and the Niaoduqing Granule group was given suspension containing 0.25 g/ml of the original drug. Three TCM groups had prepared different doses of Chinese medicine gavage according to the clinical adult dosage of 9 times， 6 times， 3 times， course of treatment respectively for 8 weeks. The levels of PTH， Scr and BUN in each group of CRF rats were detected. Result： Compared with the sham operation group， PTH， Scr and BUN were significantly increased in the model group and Hb and RBC were significantly decreased， there was statistical significance （P<0.05）. PTH， Scr and BUN were decreased （P<0.05）， and Hb and RBC were increased （P<0.05）. Among them， the large and medium dose groups of TCM were the best， and the difference between the two groups was not statistically significant （P>0.05）.Conclusion： Fuzheng Xiezhuo Baoshen Decoction can help lower the levels of PTH， SCr and BUN in rats with chronic renal failure， reduce clinical symptoms， protect renal function and prolong the process of renal failure.

[Key words] Fuzheng Xiezhuo Baoshen Decoction CRF rats PTH Scr BUN

First-authors address： Affiliated Hospital of Shanxi University of Chinese Medicine， Xianyang 712000， China

慢性肾衰竭（CRF）是各种慢性肾脏疾病进展所导致的肾功能减退及由此引起的机体内环境紊乱的临床综合征，涉及多个系统，为临床急危重症之一，目前尚无治愈方法。中医中药在延缓肾功能进展、改善临床症状、提高患者生存质量等方面疗效稳定。前期我们应用扶正泄浊保肾汤治疗CRF取得了较好的临床疗效[1-3]，并通过实验研究已初步探讨了其部分作用机制[4-7]，本研究通过观察扶正泄浊保肾汤对慢性肾衰大鼠的治疗作用，探讨其降低PTH水平延缓肾功能进展的可能機制，为药物进一步研发提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 清洁级、雄性Spragoe-Dawley（SD）大鼠60只，6～8周龄，体质量（200±20）g，购自西安交通大学医学院实验动物中心，动物生产许可证号：2017-001。

1.1.2 药物与试剂 本方由冬虫夏草（百令胶囊）6 g，熟地12 g，黄芪30 g，党参20 g，当归10 g，山药15 g，白术10 g，枳实10 g，法半夏12 g，陈皮12 g，云苓20 g，制大黄10 g，车前子20 g，水蛭6 g，煎煮浓缩（2 g生药/ml）;阳性对照药物：尿毒清颗粒，康臣药业有限公司，国药准字Z20073256，5 g/袋，配制成1 ml含0.25 g尿毒清颗粒水溶液。血PTH放免试剂盒由上海信帆生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 模型复制及分组 SD大鼠60只适应性饲养1周后，随机分为假手术组（8只）、手术组（52只）。采用5/6肾切除方法建立CRF模型[8]。操作步骤：术前禁食12 h，SD大鼠10%水合氯醛（35 mg/100 g）麻醉后，选择左侧背部肋下约0.5 cm为切开，剃毛、消毒，逐层切开、分离皮肤、肌层至腹腔，暴露左肾，钝性分离肾周脂肪，剥离肾包膜，切除左肾上下级各约1/3皮质，明胶海绵贴敷止血，复位残肾，逐层间断缝合;1周后行右肾全切术，麻醉、消毒方法同前，暴露右肾后，游离肾下极附近输尿管，止血钳钳夹后于两钳间剪断，远端结扎，近段随同肾蒂一起剥离，止血钳钳夹于近肾端切除，逐层间断缝合。假手术组：剃毛、消毒、逐层切开分离方法同前，暴露左肾不行切除术，后逐层间断缝合;1周后暴露右肾，手术方法同前。手术组大鼠饲养2周后，1期手术大鼠死亡2只，将存活造模大鼠随机分为模型组、尿毒清阳性对照组、中药（扶正泄浊保肾汤）大、中、小剂量组，每组各10只。

1.2.2 给药方法 参照文献[9]按照10 ml/（kg·d）给予大鼠灌胃，中药组每日给予扶正泄浊保肾汤灌胃，其中大剂量组2.94 g/ml（相当于成人用量9倍）、中剂量组1.96 g/ml（6倍）、小剂量组0.98 g/ml（3倍）;尿毒清组予以尿毒清颗粒水溶液（0.25 g/ml）灌胃，假手术组及模型组每日予以等量生理盐水灌胃，连续8周。

1.3 观察指标

PTH采用放射免疫法检测，血肌酐（Scr）检测采用苦味酸法，尿素氮（BUN）检测采用尿素酶法，按照试剂盒说明操作。

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0统计软件进行统计分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对CRF大鼠PTH、肾功、血常规的影响

各治疗组PTH、肾功及血常规水平均较模型组改善（P<0.05），中药大剂量和中剂量组为佳;中药大、中剂量组间及中药小剂量与尿毒清组间差异均无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2 对CRF大鼠体质量的影响

给药后，各组大鼠体质量均有所增加。用药至第2周，各组间大鼠体质量无明显差异;至第5周，中药大、中剂量组与模型组相比体质量明显增加（P<0.05）;第8周，中药各组及尿毒清组大鼠体质量较模型组增加（P<0.05），其中以中药大、中剂量显著，见表2。

3 讨论

慢性肾功能衰竭是各种原发性或继发性肾脏疾病进展的共同结局，多系统并发症及高额费用严重威胁着人类健康。美国1999-2004年健康与营养调查结果显示，20岁以上美国成年人中CKD的患病率较1988-1994年上升了30%[10]，王海燕教授牵头的调查指出CKD的知晓率仅为12.5%[11]，其高发病率、低知晓率已成为肾脏病学界所面临的严重公卫问题。扶正泄浊保肾汤是治疗慢性肾衰的有效方药，以往的动物实验显示，该方可通过降低白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）等因子水平、抑制血栓烷2（TXB2）等的高表达，从而改善肾脏血供，提高肾小球滤过率，减轻微炎症状态、抑制系膜基质增生，达到延缓肾功能恶化的作用[7]。

甲状旁腺激素（PTH）被认为是最重要的一种尿毒症毒素，高PTH血症可通过增加细胞内钙浓度、改变细胞膜通透性、细胞内环酸腺苷增加、软组织改化、蛋白分解增加等多方面是循环血液中含氮废物增加[12];同时高PTH血症也是尿毒症症状的重要原因，引起一系列的机体症状，临床上PTH水平是CRF患者病情程度和评价预后的一个重要指标。PTH参与多脏器损害的发生[13]，无论在CRF早期、终末期，高PTH水平导致细胞内钙含量升高，细胞线粒体功能丧失并最终致细胞死亡，机体广泛受损[14]，其靶器官除肾和骨外，也作用于其他细胞，如神经细胞等，因此慢性肾衰竭患者常有神经、精神异常，如直觉性精神异常、情感障碍、癫痫样发作、周围神经病变等[13];另外CRF患者PTH水平与左心室结构和功能的关系也十分密切[15]，亦有报道指出PTH是影响尿毒症患者高血压的主要因素，其与血压呈正相关[16]。扶正泄浊保肾汤一合四君子汤之意，益气健脾，枢利中焦气机，以复肾中元气;二寓参芪地黄汤方，益气滋阴补肾，共泻肾浊;三藏当归补血汤养血和血;四暗温胆汤祛瘀化湿排毒;全方共奏“健脾益肾平衡阴阳以扶正，活血化瘀祛湿排毒以泄浊”之功;该方作为中药有效单体的复方制剂，通过系列反应途径共同遏制了CRF的发病趋势，同时帮助机体恢复生理机能，“多元多靶点、多相多途径”的作用特点正是中医药治疗的特色及优势所在，故而效果显著。本实验研究表明扶正泄浊保肾汤和尿毒清颗粒对5/6肾切除大鼠均有不同程度的降低PTH、BUN、Scr等毒素水平，改善贫血及机能状况，其中以中药大、中剂量组最佳，呈剂量依赖性，尿毒清组对毒素指标的抑制作用和中药小剂量组相当;其作用机理可能是通过降低PTH的毒性作用，进一步减少血钙含量，调整细胞内外钙浓度，恢復细胞膜通透性、改善细胞功能实现的。

本实验研究由于观察时间短、样本小等条件所限，仅初步探讨了扶正泄浊保肾汤的部分作用机理，存在一定的不足;但本实验显示扶正泄浊保肾汤对肾功具有一定的保护作用，亦印证了PTH与慢性肾功能衰竭的病情进展呈正相关。总之，具有补脾益肾、活血化瘀、祛湿泄浊功效的扶正泄浊保肾汤可以降低PTH、Scr、BUN水平，改善贫血，保护肾功、延缓CRF的进展，同时为中医中药防治CRF提供了实验依据和理论基础。

参考文献

[1]廖成荣，李伟，马居里.马居里教授运用扶正泄浊保肾汤加减治疗慢性肾功能衰竭经验探析[J].光明中医，2014：29（2）：234-235.

[2]赵莉，苏衍进，马居里，等.自拟扶正泄浊保肾汤配合西医常规治疗CRF（2-4期）30例疗效观察[J].云南中医中药杂志，2015，36（4）：55-56.

[3]朱海慧，马居里，白洁.扶正泄浊保肾汤联合西药治疗氮质血症期CRF临床观察[J].辽宁中医药大学学报，2011，13（9）：152-153.

[4]李宁，李现成.扶正泄浊保肾汤对慢性肾功能衰竭大鼠瘦素的影响[J].四川中医[J]，2014，32（7）：72-74.

[5]朱海慧，马居里，严惠芳，等.扶正泄浊保肾汤对慢性肾功能衰竭大鼠血液流变学血栓烷B2的影响[J].湖北中医杂志，2011，33（7）：5-7.

[6]马居里，耿翠翠，朱海慧，等.扶正泄浊保肾汤对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织smad4、smad7表达的影响[J].陕西中医，2013，34（2）：242-244.

[7]李宁.扶正泄浊保肾汤对5/6肾切除CRF大鼠血清瘦素、肾功能及组织病理的影响[D].陕西中医学院，2011.

[8]施新猷，顾为望.人类疾病动物模型[M].北京：人民卫生出版社，2008：206-207.

[9]施新猷.现代医学实验动物学[M].北京：人民军医出版社，2000：25-26.

[10] Coresh J，Selvin E，Stevens L A，et al.Prevalence of chronic kidney disease in the United States[J].JAMA，2007，298（17）：2038-2047.

[11]代晓光，封娟霞，陈晶.中医药治疗慢性病肾脏病的辨证论治[J].中国中西医结合肾病杂志，2013，14（10）：933-934.

[12] Denda M，Finch J，Slatopolsdy E.Phosphorus accelerates the develop-merit of parathyroid hyperplasia and secondary hypelparathyroidism inrats with renal failure[J].AMJ of Kidney，1996，28（4）：596-602.

[13]陈香美.慢性肾衰发生机制的最新概念·现代慢性肾衰治疗学[M].北京：人民军医出版社，2001：31-49.

[14]王海燕.肾脏病学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，1996：1385-1390.

[15]旺关煜，钱莹，朱萍，等.慢性肾衰患者甲状旁腺激素与左心室结构和功能的关系[J].肾脏病与透析肾移植杂志，2001，10（1）：25-27.

[16]章俊，李希杰，李幼，等.甲状旁腺激素、血小板胞浆游离钙在尿毒症患者血压调节中的作用[J].中华肾脏病杂志，1997（5）：297.

（收稿日期：2019-09-02） （本文編辑：张亮亮）