陈爱凤 丁士标 林旭瑷 孔亮亮 徐俭朴

肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension，PAH）是多种病因引起的以肺动脉压和肺血管阻力进行性增高为特征的综合征。肺血管收缩、重构和原位血栓形成是PAH形成和肺循环血流动力学改变的基础，持续发展可导致右心衰竭和死亡[1]。PAH的病理改变主要包括内皮细胞的损伤和凋亡、中膜肥厚、炎症细胞浸润和肺小动脉血栓形成[1-2]。肺血管内皮细胞损伤和功能紊乱在PAH的发生和发展过程中起着关键性作用，表现为细胞一氧化氮合酶（nitric oxidesynthase，NOS）分泌减少，结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）、内皮素-1和血栓素分泌增加[3-4]。目前的现代医学治疗方法只能起到改善症状，提高生活质量的目的，因此，亟需寻找更有效的治疗方法。红花是传统的中草药，其注射液由红花提取精制而成，主要含有查耳酮类、漆树黄酮、桑叶素、槲皮素、杨梅素等成分，具有抗氧化、抗凝、防止血栓形成、抗炎症因子、抗氧自由基和扩张血管、调节血管平滑肌细胞增殖等作用[5]。本研究通过检测红花注射液对野百合碱（monocrotaline，MCT）诱导人血管内皮细胞（human vascular endothelial cells，HUVECs）损伤模型中NO、内皮型NO合成酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）、CTGF等形成的影响，探讨红花注射液对PAH的治疗作用。

1 材料和方法

1.1 材料 MCT购自美国Sigma公司（批号：C2401-1G）。将 MCT溶于 1.0mol/L 盐酸，用1.0mol/L NaOH调节pH值至7.2，并调整浓度为20mg/ml。红花注射液购自山西华卫药业有限公司（国药准字Z14020008，批号：15010515）。抗eNOS多克隆抗体（批号：32027S）、抗β-actin单克隆抗体（批号：abs118937）、抗 CTGF 抗体（批号：86641S）购自上海优宁维生物科技有限公司。总NO检测试剂盒（批号：S0024）购自上海碧云天生物技术有限公司。PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser反转录试剂盒（批号：RR047A），TB GreenTMPremix Ex TaqTMⅡ荧光定量PCR试剂盒（批号：RR820Q）购自大连宝生物科技有限公司。……