蔡治方，彭慈军，傲宇，兑丹华，兰天罡

（遵义医学院附属医院 肝胆胰外科，贵州 遵义 563000）

急性胰腺炎（acute pancreatitis, AP）是临床中常见的急腹症之一，其病理特征为胰腺间质出现水肿、出血，腺泡细胞发生空泡变性、坏死或炎症细胞大量浸润[1]。AP因其临床结局难以预料，严重威胁患者健康。清胰Ⅱ号是遵义医学院附属医院经典中药方剂，尽管许多研究表明其对AP疗效显著，但是作用机制仍不完全明确[2]。为进一步探讨清胰Ⅱ号对AP的治疗机制，本研究利用3%牛磺胆酸钠经胆胰管逆行注射复制AP大鼠模型，观察清胰Ⅱ号灌胃对AP大鼠的胰腺保护作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

36只清洁级SD大鼠购自第三军医大学实验动物中心，许可证号：SCXK-（军）201802154，雌雄不限制，体重210～265 g，平均（238±28）g。

1.2 实验药物

清胰Ⅱ号（遵义医学院附属医院药剂科自制），浓度250 mg/ml。

1.3 试剂与仪器

牛磺胆酸钠（美国Sigma公司），大鼠肿瘤坏死因子 -α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）ELISA 试剂盒（上海齐一生物科技有限公司，QY-H10038），大鼠白细胞介素6（Interleukin 6, IL-6）ELISA 试剂盒（上海易汇生物科技有限公司，ab87933），大鼠白细胞介素1β（Interleukin 1β, IL-1β）ELISA试剂盒（上海江莱生物科技有限公司，AZ-003），iMARK 680通用酶标仪（美国Bio-Rad公司），RIPA裂解液、BCA蛋白浓度测定、组织线粒体分离试剂盒购自上海碧云天生物公司，总RNA抽提试剂Trizol、dNTP、Oligo（dT）15、Taq DNA聚合酶、一抗、二抗购自上海科华生物工程股份有限公司，组织活性氧（DHE-ROS）检测试剂盒（上海贝博生物科技有限公司），引物设计由上海生工生物工程有限公司完成，TNF-α正向引物：5'-TTCTGTCTACTGAACTTC GGGGTGATCGGTCC-3'，反向引物：5'-GTATGAGA TAGCAAATCGGCTGACGGTGTGGG-3'；IL-6正向引物：5'-TCCAGTTGCCTTCTTGGGAC-3'，反向引物：5'-GTGTAATTAAGCCTCCGACTTG-3'；IL-1β 正向引物：5'-GAAAGACGGCACACCCACCCT-3'，反向引物：5'-GCTCTGCTTGTGAGGTGCTGATGTA-3'；GAPDH正向引物：5'-CATGACCACAGTCCATGCCATCAC-3'，反向引物：5'-TGAGGTCCACCACCCTGTTGCTGT-3'。

1.4 实验分组与模型的复制

根据随机数字表法，将36只大鼠随机分为假手术组、模型组和干预组，每组12只。……