高攀 吴桐忠 刘鹏 路宗纬 景亚平

摘要：对塔额垦区6个团场的15个羊养殖场（户）采样并分离大肠杆菌，用纸片擴散法进行抗菌药物敏感性检测。结果共分离76株大肠杆菌，临床药敏试验显示，67.1%的菌株对5～10种的抗菌药耐药，32.9%的菌株对10种以上的抗菌药物耐药，无完全耐药菌株，其中，164团分离株的耐药情况较严重，61.5%的菌株对10种以上的抗菌药物耐药，161、165、168与170的情况稍好。塔额垦区规模化养殖场中的羊源大肠杆菌对当前临床上允许使用的多种类型抗菌药物呈现一定程度的耐药，尤其是对临床中使用较多的青霉素、阿莫西林等耐药，这种耐药性的产生将对大肠杆菌病的抗菌药物治疗形成严重挑战，应选择性地使用抗菌药物，避免乱用、滥用抗菌药物，建议以流行菌株的耐药性为依据开展临床治疗。

关键词：羊规模养殖场;大肠杆菌;临床药敏试验

中图分类号：S859        文献标识码：A        文章编号：1007-273X（2019）12-0005-03

畜牧业一直是新疆塔额垦区经济发展的支柱产业之一，养羊业在畜牧业生产中始终处于重要不可替代的位置。大肠杆菌是肠道菌群的共生菌，可作为耐药基因贮藏库[1]。羊大肠杆菌病由致病性大肠杆菌（Escherichia coli）感染羊肠道或全身组织而引起，临床主要分为败血型和肠道型2种[2]。败血型主要表现全身症状，是由大肠杆菌侵入机体血液和组织液引起，体温升高可达42 ℃，以15日龄到2月龄间的羔羊发病最严重;肠道型以肠炎表现为主，主要发生于1周内的羔羊，病羊体温可升高到40～41 ℃，不及时治疗可在24 h内死亡，病死率达80%，给养羊业造成的经济损失较大[3]。抗菌药物是塔额垦区治疗该病的常用药物，主要有庆大霉素、安普霉素、恩诺沙星、氟苯尼考、多西环素、阿莫西林以及磺胺类药物等[4]。随着规模化水平提高和抗菌药物广范使用，对抗菌药物已呈现出越来越普遍的耐药性[5]，给临床治疗带来很大困难，了解塔额垦区各地养殖场羊大肠杆菌的耐药谱，筛选出高敏抗菌药物或组合进行治疗，能有效提高治疗效率，并延缓抗药性的快速蔓延。研究从多个团场的不同养殖场中随机采取样品，分离、鉴别出大肠杆菌，并参考抗菌药物敏感性试验执行标准及第23版资料增刊[6]，进行分离菌株的临床药敏试验，分析羊大肠杆菌的耐药现状，为基层临床兽医合理用药提供参考。

1  材料与方法

1.1  材料

2018—2019年，在新疆塔额垦区161、164、165、167、168、170团6个团场选取2～3个养殖场（户），肛子拭随机采集羊粪样。

1.2  方法

肛拭子接种于大肠杆菌特异性培养基，即伊红美蓝和麦康凯琼脂，37 ℃培养12～18h，观察菌落形态。大肠杆菌在麦康凯培养基上的菌落形态特征为桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润;在伊红美蓝培养基上形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。将纯化后的单个菌落接种于全自动微生物鉴定系统（VITEK 2 Compact System）进行生化鉴定，确定其菌种。

1.3  临床药敏试验

临床药敏试验使用纸片法，抗菌药物药敏纸片选取临床常用抗菌药物并参考“抗菌药物敏感性试验执行标准”中“美国临床微生物学实验室非苛养菌常规药敏试验和报告抗菌药物的建议分组”，共选取20种药物进行敏感性检测，分别为青霉素、阿莫西林、头孢唑啉（先锋Ⅴ）、头孢他啶（复达欣）、头孢拉定（先锋Ⅵ）、头孢哌酮（先锋必）、链霉素、庆大霉素、阿米卡星（丁胺卡那霉素）、麦迪霉素、阿奇霉素、强力霉素（多西环素）、氟苯尼考、多粘菌素B、诺氟沙星（氟哌酸）、恩诺沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明、克林霉素（氯洁霉素）。量取抑菌圈直径大小，反映分离病原对药物的敏感程度。药敏试验中使用的培养基、培养时间、试验操作、质控菌株等均按照抗菌药物敏感试验的执行标准进行[7]。

2  结果与分析

2.1  161团分离菌株临床药敏试验结果

161团15株大肠杆菌的抗菌药物临床药敏试验显示，所有的菌株对强力霉素、克林霉素耐药;90%以上的菌株对青霉素、麦迪霉素耐药;80%以上的菌株对阿莫西林、头孢拉定耐药;60%以上的菌株对链霉素、庆大霉素、氟苯尼考耐药;40%以上的菌株对阿米卡星、阿奇霉素、诺氟沙星耐药;对头孢唑啉、头孢他啶、头孢哌酮、多粘菌素B、恩诺沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明表现敏感，耐药株不超过40%。试验结果见表1。

2.2  164团分离菌株的临床药敏试验结果

164团13株大肠杆菌的抗菌药物临床药敏试验显示，所有的菌株对青霉素、阿莫西林、麦迪霉素、强力霉素、克林霉素耐药;90%以上的菌株对氟苯尼考耐药;80%以上的菌株对头孢拉定耐药;60%以上的菌株对链霉素、庆大霉素、阿米卡星、阿奇霉素、诺氟沙星耐药;对头孢唑啉、头孢他啶、头孢哌酮、多粘菌素B、恩诺沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明表现敏感，耐药株均不超过40%。试验结果见表2。

2.3  165、167、168团分离菌株临床药敏试验结果

165、167、168团36株大肠杆菌的抗菌药物临床药敏试验显示，所有的菌株对克林霉素耐药;90%以上的菌株对青霉素、麦迪霉素、强力霉素耐药;80%以上的菌株对阿莫西林、头孢拉定耐药;60%以上的菌株对链霉素、庆大霉素、氟苯尼考耐药;40%以上的菌株对阿米卡星、阿奇霉素、诺氟沙星耐药;对头孢唑啉、头孢他啶、头孢哌酮、多粘菌素B、恩诺沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明表现敏感，耐药株均不超过40%。试验结果见表3。