■任玉琴 吴望君 张晓丽

（浙江省兽药饲料监察所，浙江杭州311199）

我国是维生素K3的生产大国，其生产总量已超过全球产量的一半。维生素K3具有凝血功能，在畜禽和水产饲料中被广泛使用，中国兽药典[1]、中国药典[2]均收载了亚硫酸氢钠甲萘醌，农业部《饲料添加剂品种目录(2013)》[3]收录了3种维生素K3类饲料添加剂，即亚硫酸氢钠甲萘醌(MSB)、亚硫酸氢烟酰胺甲萘醌(MNB)和二甲基嘧啶醇亚硫酸甲萘醌(MPB)。MSB、MNB和MPB均以甲萘醌为官能团，在侧链上与不同基团结合形成的衍生物。维生素K3在饲料中的留存率低，饲料加工、载体等影响产品在饲料中的稳定性，在畜禽饲喂中生物利用率也存在差异，其中MNB在饲料中最具稳定性，生物利用率最高，MPB次之，MSB最不稳定[4]。MSB、MNP和MPB具有类似的功能和外观，现行的质量标准方法中采用甲萘醌官能团和相应的衍生基团进行鉴别试验，如甲萘醌的沉淀反应、二氧化硫的气味鉴别及烟酰胺的薄层色谱法等，鉴别方法繁锁，专属性不强[5]，需用多种方法加以配套。本文建立了用高效液相色谱法同时鉴别3类维生素K3化合物，方法操作简便、专属性强，能有效甄别3类维生素K3。

1 材料和试剂

亚硫酸氢钠甲萘醌，批号：11203112、11203203、12070701；亚硫酸氢烟酰胺甲萘醌，批号：13052902、13081204、13081302；二甲基嘧啶醇亚硫酸甲萘醌，批号：10122701、11052905、11052806；均来源于兄弟科技有限公司。

甲萘醌对照品：由中国兽医药品监察所提供，批号V0011003，含量为99.3%。

2 仪器和设备

Angliln1100高效液相色谱仪，带DAD检测器；Waters 2690高效液相色谱仪，带UV检测器；北京普析通用公司，TU-1910紫外-可见分光光度计。……