一菌双酶法转化富马酸生成β-丙氨酸
2018-12-26陈明亮肖延铭李敬亚梁阿朋
陈明亮,祁 瑛,肖延铭,华 超,李敬亚,梁阿朋
(1.长兴制药股份有限公司 工业生物催化与转化浙江省工程研究中心,浙江 长兴313100;2.郑州大学 化学与分子工程学院,河南 郑州450001)
L-天冬氨酸(L-Aspartic acid)是一种常见的酸性氨基酸,在医药、食品、美容、化工和材料等方面具有非常广泛的用途[1-2]。以L-Asp为原料合成的阿斯巴甜和纽甜,适用于儿童、孕妇、哺乳期妇女以及肥胖、心血管病和糖尿病患者在内的所有人群[3-4]。L-Asp还参与鸟氨酸循环,可用作氨解毒剂、肝机能促进剂和疲劳恢复剂等药品以及食品添加剂[5]。工业生产L-Asp主要是由天冬氨酸转氨酶(L-Aspar-tase,EC4.3.1.1,AspAT)催化富马酸加氨合成,具有酶活力高、工艺简洁和设备投资少等优势,是当今生产 L-Asp的主流工艺[6-7]。β-Ala是自然界中唯一存在的β-型氨基酸,也是一种非蛋白氨基酸,存在于某些细菌、真菌和植物中[8]。β-Ala及其衍生物在医药、食品和化工等领域都有着广泛的应用。在医药方面,β-Ala用于合成泛酸、泛酸钙、肌肽、帕米膦酸钠和巴柳氮等[9];在化工方面应用于电镀、铅中毒解毒剂及合成甜味剂[10]。国内外β-Ala的生产主要以化学合成法为主[11],即以丙烯酸或丙烯腈为底物进行合成,此法生产过程中消耗大量能量,同时对环境和生物体都有一定的毒害作用。另一种生产方法是生物合成法,利用L-天冬氨酸α-脱羧酶(L-aspartateα-decarboxylase,EC4.1.1.11,PanD)、以 LAsp为底物催化生成β-Ala[12],此法专一性高且环保,缺点是L-Asp价格偏高。L-天冬氨酸α-脱羧酶催化L-天冬氨酸脱去α位的羧基生成β-Ala,是生物体内泛酸合成中重要的酶。酶法制备β-Ala的研究中,江南大学高宇通过偶联天冬氨酸转氨酶和L-天冬氨酸α脱羧酶直接以富马酸和氨为底物合成β-Ala,且产量达到9.8g/L[13]。……
