亓颖芝,郎晓艳,周静,李春凤,李静,芦鑫

(山东大学第二医院,济南250033)

宫颈癌是一种女性常见恶性肿瘤[1]。近年，我国宫颈癌发病率和病死率明显上升。miRNA是一类大小为18～25个核苷酸的非编码单链RNA，通过与mRNA的非编码区3′UTR相互结合，来发挥对靶mRNA的降解或抑制其翻译[2]，其广泛分布于血清、尿液、脑脊液等体液中，且稳定存在。有文献[3]报道，miR-374a在结肠癌中表达水平较癌旁组织明显上调[4]；其在非小细胞肺癌中的表达也明显升高；Cai等[5]发现，miR-374a可以激活Wnt/β-catenin分子通路，进而促进乳腺癌的侵袭转移。因此，推测miR-374a可能在肿瘤发生发展中发挥重要作用。但是目前关于miR-374a表达水平与宫颈癌患者临床病理特征的相关性尚未见报道，本研究进行了相关探讨。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2015年8月～2017年4月入住山东大学第二医院妇科拟手术治疗的宫颈癌患者68例，均经病理检查确诊。术前均未行化疗、放疗等其他治疗。年龄33～65岁。病理分级：G1级20例、G2级33例、G3级15例；临床分期按国际妇产科联盟分期标准:Ⅰ期30例、Ⅱ期38例；组织类型：鳞癌40例、腺癌28例；有淋巴结转移23例，无45例；根据是否感染人类乳头瘤病毒(HPV)划分:阳性50例，阴性18例;肿瘤直径≥4 cm 23例，<4 cm 45例。选取体检健康者36例作为对照组，年龄35～60岁。无宫颈部位的病变或者癌症史。所有血液标本收集后置于-80 ℃低温保存。

1.2 血清miR-374a的检测 采用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)法。提取RNA：术前抽取宫颈癌患者静脉血，总RNA于患者和正常体检者血清中提取，提取方法按照天根miRcute miRNA提取分离试剂盒说明书操作。提取后使用紫外分光光度仪检测样品的浓度与纯度，进行后续试验。合成cDNA：按照First Strand cDNA Synthesis Kit说明书加入反转录反应所需要的各种试剂，将总RNA进行逆转录合成cDNA。……