坛紫菜丝氨酸羟甲基转移酶基因的克隆及表达特征*
2018-11-13林颖辉王文磊纪德华陈昌生谢潮添
林颖辉 王文磊 徐 燕 纪德华 陈昌生 谢潮添
坛紫菜丝氨酸羟甲基转移酶基因的克隆及表达特征*
林颖辉 王文磊 徐 燕 纪德华 陈昌生 谢潮添①
(集美大学水产学院 厦门 361021)
丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)在植物应答逆境胁迫中发挥着重要作用。本研究以坛紫菜()为研究材料,采用普通PCR技术克隆得到2条坛紫菜的全长基因序列,分别命名为(GenBank收录号:MF687405)和(GenBank收录号:MF687406)。其中,序列全长1710 bp,包含一个1491 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含497个氨基酸,分子量为121.443 kDa,等电点为4.93;序列全长1957 bp,包含一个1395 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含465个氨基酸,分子量为113.969 kDa,等电点为4.95。多序列比对和系统进化树分析结果确认和基因属于基因家族。qRT-PCR定量分析结果表明,高温胁迫条件下,2条基因的表达模式基本一致,均表现为先上调后下调再上调的趋势,这说明基因可能在坛紫菜应答高温胁迫过程中发挥作用。
坛紫菜;高温胁迫;丝氨酸羟甲基转移酶;活性氧;基因克隆
丝氨酸羟甲基转移酶(Serine hydroxyl methyl- transferase, SHMT)(Schirch, 2005)广泛存在于真核生物和原核生物中,在高等植物的一碳化合物代谢和光呼吸过程发挥着重要作用,其主要功能是为蛋白质和嘌呤的生物合成提供甘氨酸,并生成N5,N10-亚甲基四氢叶酸(McClung, 2000)。四氢叶酸是植物体内参与C1转移反应的重要辅酶,并且在植物的甲基循环过程中发挥重要作用(Bekaert, 2008)。生成的亚甲基四氢叶酸参与了DNA和RNA的合成,并在亚甲基四氢叶酸还原酶的作用下,再经过一系列的转化,最终生成S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-methionine, SAM),从而直接参与DNA的甲基化过程(Du, 2017)。……
